以从日本引进的苹果新品种斗南为试验材料,根据保守氨基酸序列"FTQQYQ"和"anti-1/WⅠPNV"设计苹果自交不亲和基因引物,P1:5′-TTTACGCAGCAATATCAG-3′;P2:5′-ACGTTCGGCCAAATA/CATT-3′。利用PCR-RFLP分析和目的片段测序方法得到了一个新的苹果自交不亲和基因-S33,其片段长度为348bp,包括P1、C2区和HV(含147bp的Intron)区。