适用于生菜叶片蛋白质双向电泳方法的建立及初步应用

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适用于生菜叶片蛋白质双向电泳方法的建立及初步应用
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中图分类号:Q510.3 S792.153
基金项目:农业部引进国际先进农业科学技术计划(948计划)，上海市科委技术标准专项基金?

Two-dimensional Electrophoresis for Leaf Protein of Lettuce(Lactuca sativa)and Its Primary Application

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以生菜(Lactuca sativa)叶片为研究材料,参考拟南芥和水稻的双向电泳方法,分析了等点聚焦时间和染色方法等影响双向电泳的关键因素,建立适合生菜叶片总蛋白质分离的双向电泳方法:采用三氯乙酸-丙酮沉淀法进行总蛋白质提取,用24cm固相pH梯度等电聚焦8000V×8h结合12%的SDS-PAGE进行双向电泳分离,银染法和考马斯亮蓝染色法染色都获得了较好的结果.应用Image-Master-Elite软件对考马斯亮蓝染色法染色的图谱进行分析表明:每张凝胶上都检测到超过1000个的蛋白质,不同凝胶之间蛋白质的匹配律达到98%,具有较高的分辨率和重复性.初步分析了生菜叶片蛋白质的等电点、分子量的分布情况,发现生菜叶片蛋白质的等电点以5.0～5.5之间最多而分子量主要集中在20～60kD之间.

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刘丽娟,舒烈波,陈海荣,等.适用于生菜叶片蛋白质双向电泳方法的建立及初步应用[J].植物遗传资源学报,2009,(1).

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