摘要
依托“第三次全国农作物种质资源普查与收集行动”对安徽省各县、市的水稻地方品种资源进行了调查和收集,共收集到水稻资源82份,并对其农艺性状、稻瘟病抗性、品质等特性进行鉴定评价。结果表明,地方品种资源中糯稻和有色稻资源丰富,糯稻占资源总数的56.1%,黑米和红米共占34.2%。通过鉴定筛选出具有大穗、高穗粒数、高结实率、高千粒重等优良性状资源34份、抗稻瘟病资源17份、优质资源6份;进一步通过分子标记鉴定,阐明这些优异资源中所携带的稻瘟病、垩白、香味等基因型。筛选出稻八、夹沟香稻、三粒寸、庄红贡米、庐江小红稻-1和长粒糯稻6份产量、稻瘟病抗性和品质等综合性状优异的资源,为高产、优质、抗病水稻育种提供材料基础。
水稻是我国主要粮食作物之一,全国水稻年种植面积约4.48亿亩。安徽是水稻种植大省,常年水稻播种面积3600多万
种质资源是新基因发掘和水稻育种的重要物质基
地方品种资源由于其独特的风味、优异的性状和当地的风俗习惯等被保留下来,这些资源类型丰富、遗传多样性高,将在水稻育种中具有潜在的利用价
本研究所用的试验材料为依托第三次全国农作物种质资源普查,安徽省组织相关专家对安徽省境内各县(市)进行系统调查收集得到的82份水稻地方品种资源,均保存于安徽省农业科学院水稻研究所种质资源库。
对收集的82份种质资源进行整理编号,在安徽省农业科学院水稻研究所滨湖试验基地分别于2020年和2021年种植鉴定,每年设置两次重复,5月20日播种,6月19日单本移栽,栽插规格为13.33 cm×26.67 cm,每份材料种植4行,每行20株,共计80株,田边设保护行,始穗期开始每3~4天调查抽穗期,成熟期调查株高、单株有效穗数、穗长、每穗粒数、结实率、千粒重等主要农艺性状,每份材料各重复调查10株,以其平均值作为统计单元。对抽穗天数、株高等主要性状进行分类整理,鉴定筛选各性状突出的种质。
稻瘟病抗性鉴定采用叶瘟和穗瘟自然诱发鉴定以及穗瘟人工接种鉴定相结合的方法进行。在安徽省金寨县稻瘟病鉴定圃分别于2020年和2021年进行自然诱发鉴定,5月5日播种,6月4日单本移栽,每个材料种植2行,每行9株;每个小区的两端和田边保护行均种植诱发品种,分蘖期适当重施氮肥以促进稻瘟病发生。叶瘟和穗瘟分别于水稻分蘖盛期和黄熟期调查,按照行业标准“NY/T2646-2014水稻品种试验稻瘟病抗性鉴定与评价技术规程”分级评
于2021年在安徽合肥进行稻瘟病人工接种鉴定,所用菌株为安徽省稻瘟病优势混合菌株,利用稻瘟病优势小种培养基(将去皮切成2 cm大小的马铃薯200 g,加入适量ddH2O煮20 min,过滤,滤液中加入18 g琼脂和20 g蔗糖,搅拌溶解,加ddH2O定容至1000 mL,过滤分装,121 ℃ 5 min高温灭菌)对稻瘟病菌株进行28 ℃黑暗培养3 d,转入灭菌大麦中培养8~10 d,待菌丝长出后,用ddH2O洗脱菌落,菌液浓度为1×1
成熟期收获82份种质资源的种子,籼稻晾干至水分含量低于13.5%以下,粳稻晾至水分含量低于14.5%以下。根据农业行业标准NY/T 593-201
对农艺性状优异、稻瘟病抗性强、优质的地方品种资源等48份进行分子检测分析。采用常规CTAB法对水稻资源进行DNA提取。稻瘟病基因Pita、Pib、Pikm、Pi54和Pi5以及垩白基因chalk5利用琼脂糖凝胶电泳检测,稻瘟病基因Pid2和Pid3扩增酶切后利用琼脂糖凝胶电泳检测,稻瘟病基因Pia和香味基因badh2利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检
对安徽省内各县市水稻地方品种资源进行收集和整理,共收集水稻资源82份(

图1 安徽水稻地方品种资源的鉴定与分类
Fig.1 Rice landraces identification and classification in Anhui province
A:地方品种资源的田间鉴定;B~D:地方品种资源的分类
A: Field identification of rice landraces; B-D: Classification of rice landraces
对82份地方品种资源进行抽穗期、株高、单株有效穗数、穗长、每穗粒数、结实率、千粒重等主要农艺性状的调查与分析,结果表明,抽穗天数最短的是黑粳糯2号为75 d,最长的是群英稻和泾县小红稻,均为105 d,抽穗天数90 d以下的资源有53份,占64.6%(

图2 水稻地方品种资源的主要农艺性状分布
Fig.2 Distribution of main agronomic traits in rice landraces
编号 Code | 采集编号 Collection code | 种质名称 Name of germplasm | 主要农艺性状 Main agronomic traits | 来源 Origin |
---|---|---|---|---|
1 | P341723008 | 稻八 | 高千粒重(29.2 g) | 青阳县 |
2 | P341302054 | 夹沟香稻 | 高结实率(96.7%) | 宿州市 |
3 | P341225003 | 蛤蟆稻 | 高结实率(95.3%) | 阜南县 |
4 | P341124007 | 小红稻 | 高结实率(93.7%) | 全椒县 |
5 | P340828036 | 麻壳籼 | 高结实率(93.2%) | 岳西县 |
6 | P340825013 | 太湖雪花糯 | 高结实率(94.7%) | 太湖县 |
7 | P340825002 | 金丝糯 | 高结实率(94.4%) | 太湖县 |
8 | P340825001 | 黄金糯 | 穗长较长(29.1 cm) | 太湖县 |
9 | P340824105 | 三粒寸 | 高结实率(93.9%) | 潜山市 |
10 | P340824104 | 麻籼稻 | 穗粒数多(253粒) | 潜山市 |
11 | P340824087 | 大麻稻 | 穗长较长(29.1 cm)、高千粒重(32.4 g)、高结实率(94.4%) | 潜山市 |
12 | P340824011 | 红皮麻稻 | 高结实率(95.2%) | 潜山市 |
13 | P340122038 | 黑糯稻 | 穗长较长(30.9 cm)、穗粒数多(298粒) | 肥东县 |
14 | 2020341038 | 香稻81-2 | 高千粒重(30.2 g)、高结实率(93.2%) | 南陵县 |
15 | 2020341047 | 三粒寸糯稻 | 穗长较长(29.0 cm)、高结实率(94.5%) | 南陵县 |
16 | 2020342032 | 菖蒲红壳糯 | 穗粒数多(251粒) | 岳西县 |
17 | 2020342154 | 桃李黄壳糯 | 穗粒数多(264粒) | 岳西县 |
18 | P340223531 | 小粒籼 | 千粒重小(14.8 g)、高结实率(95.0%) | 南陵县 |
19 | P340722003 | 扬白糯 | 高结实率(96.5%) | 枞阳县 |
20 | P341226020 | 庄红贡米 | 穗粒数多(300粒) | 颍上县 |
21 | P341226021 | 乡籼稻 | 穗长较长(28.0 cm)、穗粒数多(375粒) | 颍上县 |
22 | P341721007 | 本地红常规籼稻 | 穗粒数多(279粒) | 东至县 |
23 | P341721059 | 本地常规水稻 | 穗粒数多(272粒) | 东至县 |
24 | P341802029 | 弋江小红稻 | 高结实率(96.2%) | 宣城市 |
25 | P342529025 | 三粒寸糯稻 | 高千粒重(31.8 g) | 泾县 |
26 | P342529028 | 亩八担籼稻 | 高千粒重(29.2 g) | 泾县 |
27 | P342529045 | 南汇粳稻 | 穗粒数多(336粒)、千粒重小(14.4 g) | 泾县 |
28 | P342726021 | 白壳糯稻 | 穗粒数多(296粒) | 祁门县 |
29 | P340521021 | 黑粳糯2号 | 高结实率(96.8%) | 当涂县 |
30 | P340124037 | 黑珍珠 | 穗粒数多(252粒) | 庐江县 |
31 | P341721017 | 红壳糯 | 穗长较长(28.0 cm)、高千粒重(30 g) | 东至县 |
32 | P340223505 | 油占 | 千粒重小(15.6 g)、高结实率(95.0%) | 南陵县 |
33 | P341802032 | 棉花糯 | 千粒重高(29.0 g) | 宣城市 |
34 | P341824056 | 长粒糯稻 | 穗长较长(28.0 cm) | 绩溪县 |
采集编号由P、县代码和3位顺序号码组成,下同
Collection code is composed of P, county code and 3-digit serial number, the same as below
将病圃自然诱发鉴定和人工接种鉴定相结合对82份水稻地方品种资源进行稻瘟病抗性鉴定,叶瘟和穗瘟自然诱发鉴定分别于分蘖盛期和黄熟期调查(

图3 水稻地方品种资源稻瘟病抗性鉴定
Fig.3 Blast resistance identification of rice landraces
A~C:分别代表稻瘟病的穗瘟自然鉴定的抗病、中抗和感病表型;D~F:分别代表稻瘟病的叶瘟自然鉴定的抗病、中抗和感病表型;G~I:分别代表稻瘟病的穗瘟人工接种鉴定的抗病、中抗和感病表型
A-C represent the resistant (R), medium-resistant (MR) and susceptible (S) phenotypes of rice panicle blast by natural identification, respectively; D-F represent the resistant (R), medium-resistant (MR) and susceptible (S) phenotypes of rice leaf blast by natural identification, respectively; G-I represent the resistant (R), medium-resistant (MR) and susceptible (S) phenotypes of rice panicle blast by manual inoculation identification, respectively
编号 Code | 采集编号 Collection code | 种质名称 Name of germplasm | 叶瘟自然鉴定 Natural identification of leaf blast | 穗瘟自然鉴定 Natural identification of panicle blast | 穗瘟人工接种鉴定 Artificial inoculation identification of panicle blast | 来源 Origin |
---|---|---|---|---|---|---|
1 | P341302054 | 夹沟香稻 | MR | MR | MR | 宿州市 |
2 | P341225003 | 蛤蟆稻 | R | R | MR | 阜南县 |
3 | P340827016 | 群英稻 | R | R | MR | 望江县 |
4 | P340825013 | 太湖雪花糯 | MR | MR | MR | 太湖县 |
5 | P340825012 | 麻谷隆 | R | R | MR | 太湖县 |
6 | P340824105 | 三粒寸 | R | R | MR | 潜山市 |
7 | P340824103 | 江西糯 | R | R | MR | 潜山市 |
8 | P340824003 | 传种水稻 | R | R | R | 潜山市 |
9 | P340181139 | 麻壳籼 | R | R | MR | 巢湖市 |
10 | P340223531 | 小粒籼 | R | R | MR | 南陵县 |
11 | P340225035 | 小红稻二号 | R | R | R | 无为市 |
12 | P341003007 | 矮秆糯稻 | R | R | MR | 黄山市 |
13 | P341721030 | 三粒寸糯稻 | R | R | MR | 东至县 |
14 | P341721059 | 本地常规水稻 | MR | MR | MR | 东至县 |
15 | P342529035 | 泾县小红稻 | MR | MR | MR | 泾县 |
16 | P340223505 | 油占 | R | R | R | 南陵县 |
17 | P341824056 | 长粒糯稻 | R | R | MR | 绩溪县 |
82份种质类型丰富,品质亦存在较大差异,有糯米、红米、黑米等资源(

图4 部分地方品种资源米质外观表型
Fig.4 Rice appearance phenotype of partial landraces
A:糙米外观表型,从左到右依次为黑糯稻(P340122038)、鸡血糯(P340124038)、香血糯(P340521025)和黑粳糯3号(P340521022);B:精米外观表型,从左到右依次为黑珍珠(P340124037)、黑稻(P341226006)、黑粳糯2号(P340521021)和蛤蟆稻(P341225003);C:精米外观表型,从左到右依次为龙泉糯(P340827029)、三粒寸(P340824105)、金丝糯(P340825002)和棉花糯(P341802032);D:精米外观表型,从左到右依次为弋江小红稻(P341802029)、庄红贡米(P341226020)、稻八(P341723008)和乡籼稻(P341226021)
A indicates phenotype of brown rice, from left to right are Heinuodao (P340122038), Jixuenuo (P340124038), Xiangxuenuo (P340521025) and Heigengnuo3hao (P340521022); B indicates phenotype of polished rice, from left to right are Heizhenzhu (P340124037), Heidao (P341226006), Heigengnuo2hao (P340521021) and Hamadao (P341225003); C indicates phenotype of polished rice, from left to right are longquannuo (P340827029), sanlicun (P340824105), Jinsinuo (P340825002) and Mianhuanuo (P341802032); D indicates phenotype of polished rice, from left to right are Yijiangxiaohongdao (P341802029), Zhuanghonggongmi (P341226020), Daoba (P341723008) and Xiangxiandao (P341226021)

图5 水稻地方品种资源各品质性状的频率分布
Fig.5 Frequency distribution of quality traits in rice landraces
编号 Code | 采集编号 Collection code | 种质名称 Name of germplasm | 直链淀粉含量(%) Amylose content | 碱消值 Alkali value | 胶稠度(mm) Gel consistency | 类型 Type | 来源地Origin |
---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | 2020344128 | 三关黑米 | 0.9 | 7.0 | 100 | 糯稻 | 明光市 |
2 | 2020342136 | 木子糯 | 1.5 | 7.0 | 100 | 糯稻 | 岳西县 |
3 | P341003063 | 稻 | 0.6 | 7.0 | 100 | 糯稻 | 黄山市 |
4 | P340221026 | 红色麻壳籼 | 13.0 | 7.0 | 75 | 粘稻 | 芜湖市 |
5 | P341124007 | 小红稻 | 14.2 | 7.0 | 69 | 粘稻 | 全椒县 |
6 | P340124033 | 庐江小红稻-1 | 13.9 | 7.0 | 65 | 粘稻 | 庐江县 |
利用分子标记对农艺性状优异、稻瘟病抗性强、优质的地方品种资源进行稻瘟病(Pita、Pib、Pikm、Pi54和Pi5)、垩白(chalk5)、香味(badh2)等相关基因的基因型检测。按照

图6 地方品种资源稻瘟病抗性和品质相关基因分子检测
Fig.6 Molecular detection of genes related to rice blast resistance and quality in rice landraces
M代表DNA标记;(+)代表蕴含检测基因的条带;(-)代表不含有检测基因的条带
M indicates DNA marker; (+) and (-) represent bands with and without the detected gene, respectively
编号 Code | 采集编号 Collection code | 种质名称 Name of germplasm | 香味基因 Fragrance gene | 低垩白基因 Low chalky gene | 稻瘟病抗性基因 Blast resistance gene |
---|---|---|---|---|---|
1 | P341723008 | 稻八 | badh2 | — | Pia/Pib/Pid2/Pid3 |
2 | P341302054 | 夹沟香稻 | badh2 | — | Pia |
3 | P341225003 | 蛤蟆稻 | — | — | Pi54/Pi5/Pid3 |
4 | P341124007 | 小红稻 | — | — | Pib/Pi54/Pid3 |
5 | P340827016 | 群英稻 | — | chalk5 | Pib/Pi54/Pid3 |
6 | P340825013 | 太湖雪花糯 | — | — | Pikm |
7 | P340825012 | 麻谷隆 | — | — | Pita/Pi5/Pid2/Pid3 |
8 | P340825002 | 金丝糯 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
9 | P340825001 | 黄金糯 | — | — | — |
10 | P340824105 | 三粒寸 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
11 | P340824104 | 麻籼稻 | — | chalk5 | Pi54/Pid3 |
12 | P340824103 | 江西糯 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
13 | P340824087 | 大麻稻 | — | — | Pib/Pi54/Pid2/Pid3 |
14 | P340824011 | 红皮麻稻 | — | — | Pita/Pi54/Pi5/Pid2/Pid3 |
15 | P340824003 | 传种水稻 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
16 | P340122038 | 黑糯稻 | — | chalk5 | Pi54/Pi5/Pid3 |
17 | 2020341038 | 香稻81-2 | badh2 | — | Pi5/Pid3 |
18 | 2020341047 | 三粒寸糯稻 | — | chalk5 | Pid3 |
19 | 2020342032 | 菖蒲红壳糯 | badh2 | — | — |
20 | 2020342154 | 桃李黄壳糯 | — | — | — |
21 | 2020344128 | 三关黑米 | — | — | — |
22 | P341124007 | 小红稻 | — | chalk5 | Pib/Pi54/Pid3 |
23 | P340181139 | 麻壳籼 | — | — | Pita/Pib/Pi54/Pikm/Pid2/Pid3 |
24 | P340221026 | 红色麻壳籼 | badh2 | — | Pi54Pid3 |
25 | P340223531 | 小粒籼 | — | chalk5 | Pita/Pi5/Pid3 |
26 | P340225035 | 小红稻二号 | — | — | Pita/Pib/Pikm/Pid2/Pid3 |
27 | P340722003 | 扬白糯 | — | — | Pikm |
28 | P341003007 | 矮秆糯稻 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
29 | P341003063 | 稻 | — | — | — |
30 | P341226020 | 庄红贡米 | badh2 | chalk5 | Pita/Pib/Pi5/Pid3 |
31 | P341226021 | 乡籼稻 | badh2 | chalk5 | Pita/Pib/Pid3 |
32 | P341721007 | 本地红常规籼稻 | — | chalk5 | Pita/Pib/Pi5/Pid3 |
33 | P342529025 | 三粒寸糯稻 | — | — | Pi5/Pid3 |
34 | P341721059 | 本地常规水稻 | — | — | Pi54/Pid2/Pid3 |
35 | P341802029 | 弋江小红稻 | — | — | Pid3 |
36 | P342529025 | 三粒寸糯稻 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
37 | P342529028 | 亩八担籼稻 | — | — | Pid3 |
38 | P342529035 | 泾县小红稻 | — | — | Pi5/Pid3 |
39 | P342529045 | 南汇粳稻 | badh2 | — | — |
40 | P342726021 | 白壳糯稻 | — | — | Pi54/Pikm |
41 | P340521021 | 黑粳糯2号 | — | — | Pi54 |
42 | P340124037 | 黑珍珠 | — | — | — |
43 | P340124033 | 庐江小红稻-1 | badh2 | chalk5 | Pita/Pi54/Pi5/Pid3 |
44 | P341721017 | 红壳糯 | — | — | Pi5/Pid3 |
45 | 2020342136 | 木子糯 | — | — | — |
46 | P340223505 | 油占 | — | chalk5 | Pita/Pi54/Pi5/Pid3 |
47 | P341802032 | 棉花糯 | — | — | — |
48 | P341824056 | 长粒糯稻 | — | — | Pib/Pi5/Pid3 |
—表示未检测到相应基因
— means no relevant gene is detected
根据资源的主要农艺性状、稻瘟病抗性、品质等特性进行综合评价,筛选出6份优异水稻地方品种资源。
稻八:采集于安徽省青阳县,采集编号P341723008,籼稻品种,千粒重大,产量高,米质优。其平均株高110.5 cm,抽穗天数88 d,穗长25.9 cm,单株有效穗数12.6个,每穗粒数140粒,千粒重29.2 g,结实率90.4%,谷粒长度9.50 mm,谷粒宽度2.10 mm,长宽比4.5,单株产量40.0 g;米质较优,透明度高,外观好,直链淀粉含量14.5%,胶稠度82 mm,碱消值5.3;含有香味基因badh2和稻瘟病抗性基因Pia、Pib、Pid2、Pid3,是优质地方品种资源。
夹沟香稻:采集于安徽省宿州市,采集编号P341302054,粳型糯稻品种,产量高、中抗稻瘟病。其平均株高101.0 cm,抽穗天数82 d,穗长17.4 cm,单株有效穗数10.3个,每穗粒数189粒,千粒重27.6 g,结实率96.7%,谷粒长度5.60 mm,谷粒宽度3.20 mm,单株产量33.3 g;米质较优,外观好,直链淀粉含量2.4%,胶稠度100 mm,碱消值6.0;含有香味基因badh2和稻瘟病抗性基因Pia。该资源对稻瘟病抗性改良和优质粳型糯稻品种选育有较高的利用价值。
三粒寸:采集于安徽省潜山市,采集编号P340824105,籼型糯稻品种,结实率高,米质优,抗稻瘟病。其平均株高110.8 cm,抽穗天数88 d,穗长27.9 cm,单株有效穗数11.3个,每穗粒数187粒,千粒重28.4 g,结实率93.9%,谷粒长度7.54 mm,谷粒宽度2.41 mm,谷粒长宽比3.1,单株产量30.0 g;米质较优,外观好,直链淀粉含量2.5%,胶稠度100 mm,碱消值6.5;含有稻瘟病抗性基因Pib、Pi5和Pid3。该资源对稻瘟病抗性改良和优质籼型糯稻品种选育有较高的利用价值。
庄红贡米:采集于安徽省颍上县,采集编号P341226020,籼稻品种,红米,种皮为浅红色,香味浓,米质优。其平均株高112.2 cm,抽穗天数98 d,穗长24.0 cm,单株有效穗数10.7个,每穗粒数300粒,千粒重28.0 g,谷粒长度9.01 mm,谷粒宽度2.44 mm,谷粒长宽比3.7;米质较优,透明度好,垩白度0.21,直链淀粉含量15.2%,胶稠度57 mm,碱消值7.0;含有香味基因badh2、低垩白基因chalk5和稻瘟病抗性基因Pita、Pib、Pi5、Pid3。该地方品种入选2021年“农作物十大优异种质资源”。
庐江小红稻-1:采集于安徽省庐江县,采集编号P340124033,籼稻品种,红米,种皮为红色,香味浓,米质优。其平均株高119.7 cm,抽穗天数87 d,穗长27.1 cm,单株有效穗数13.7个,每穗粒数201粒,千粒重19.6 g,结实率92.1%,谷粒长度7.54 mm,谷粒宽度1.92 mm,谷粒长宽比3.9;米质优,直链淀粉含量13.9%,胶稠度65 mm,碱消值7.0;含有香味基因badh2、低垩白基因chalk5和稻瘟病抗性基因Pita、Pi54、Pi5和Pid3。该资源对优质籼稻品种选育有较高的利用价值。
长粒糯稻:采集于安徽省绩溪县,采集编号P341824056,籼糯稻品种,穗长较长,结实率较高,米质优,抗稻瘟病。其平均株高109.9 cm,抽穗天数90 d,穗长28.0 cm,单株有效穗数10.4个,每穗粒数200粒,千粒重27.2 g,结实率91.4%,谷粒长度7.57 mm,谷粒宽度2.44 mm,谷粒长宽比3.1,单株产量30.0 g;米质较优,外观好,直链淀粉含量2.1%,胶稠度98 mm,碱消值6.5;含有稻瘟病抗性基因Pib、Pi5和Pid3。该资源对稻瘟病抗性改良和优质籼糯稻品种选育有较高的利用价值。
种质资源的保护、鉴定与利用是保障农业科技原始创新和现代种业发展的重要物质基础。本研究通过对82份第三次普查收集的安徽省水稻地方品种资源的产量性状、稻瘟病抗性、稻米品质等特性的鉴定评价,筛选出具有大穗、高穗粒数、高结实率、高千粒重等特性的优异资源34份、稻瘟抗性较强的优异资源17份,稻米品质优良的优质资源6份,并利用分子标记鉴定这些优异资源中的香味、垩白、稻瘟病等基因型,为进一步育种利用和基因鉴定提供丰富的材料基础。
近50年,随着水稻育种的快速发展和育成品种的大面积推广应用,多数地方品种早已被育成品种所取代,导致地方品种资源流失严重,使得种质资源的普查收集面临严重挑战。安徽省地理位置复杂,地域特征明显,籼稻与粳稻、早中晚稻、粘稻与糯稻均有种植,且面积都较大,鉴定发现,地方品种资源中上述各种类型材料均存在。糯稻比例较高,占收集资源的一半以上,红米和黑米资源亦占有一定的比例(
安徽省水稻地方品种资源的保存数量较少,但其蕴含较多的优异性状。本研究通过对普查收集水稻地方品种资源的产量性状、稻瘟病抗性、稻米品质等特性的鉴定评价与综合分析,最终筛选出综合性状突出的优异种质6份,为水稻抗病、优异新种质的创制和品种选育提供材料基础。
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