2025年5月19日 10:00 星期一
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榕江茶(Camellia yungkiangensis)种质资源主要品质性状的遗传多样性分析  PDF

    吴河饶 1
    ✉
    任青艳 1
    陈莹 1
    黄大玉 1
    陈思冶 1
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    陈涛林 1
    ✉
1. 贵州大学茶学院,贵阳 550025; 2. 榕江县农业农村局,贵州榕江 557200; 3. 榕江县两汪乡人民政府,贵州榕江 557205

最近更新:2023-08-30

DOI:10.13430/j.cnki.jpgr.20230311001

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目录contents
摘要
关键词
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 榕江茶种质资源主要品质化学成分基本统计分析
2.2 榕江茶种质资源主要品质化学成分的相关性分析
2.3 榕江茶种质资源主要品质化学成分的主成分分析
2.4 榕江茶种质资源主要品质化学成分聚类分析
2.5 榕江茶种质资源的适制性分析
2.6 榕江茶优异种质资源的筛选
3 讨论
4 结论
参考文献

摘要

本研究分析了贵州特异茶树种质资源——榕江茶的品质化学成分特征及其遗传多样性,为其开发利用和特异茶树新品种培育提供科学依据。以分布在贵州省黔东南州月亮山的121份榕江茶种质资源为材料,对其水浸出物、茶多酚、游离氨基酸等21个主要品质化学成分指标进行检测分析,通过遗传多样性分析、主成分分析、聚类分析、相关性分析等对其品质性状特征和遗传多样性进行评价,并对其中的优异资源进行筛选。121份资源的21个品质化学成分指标的变异系数为5.70%~119.69%,平均为32.84%,遗传多样性指数为1.47~2.08,平均为1.95。21个品质化学成分指标的相关性分析结果显示,呈极显著正相关有42对性状,呈显著正相关的有14对,呈极显著负相关的有10对,呈显著负相关的有10对。主成分分析表明,前7个主成分特征值均大于1,且累计贡献率达76.84%,包含了原始变量的绝大部分信息,以因子得分系数矩阵求得每个单株资源的品质化学成分在各主成分上的综合得分,筛选出了12份品质化学成分综合得分高的单株资源。聚类分析显示,在欧式距离18.0处,可将121份榕江茶种质资源分为6个类群。优异种质资源筛选结果显示,121份榕江茶种质资源均属于高茶多酚(≥20.0%)、低咖啡碱(≤1.5%)、高可可碱(≥2.5%)类型的资源,其中高茶多酚(≥20.0%)、高水浸出物(≥45%)的特异类型资源有72份。榕江茶种质资源是高茶多酚、低咖啡碱、高可可碱类型的资源,其品质化学成分具有丰富的遗传多样性,具有培育特异茶树新品种的潜力。

关键词

榕江茶; 种质资源; 品质化学成分; 遗传多样性

茶树种质资源是品种创新和生物技术研究的物质基础,也是保障茶产业高质量发展的战略性资源,具有十分重要的价值和意义[

参考文献 1
百度学术    
1]。茶树起源于中国西南地区,贵州得益于独特的地理与生态环境,孕育了丰富的茶树种质资源。榕江茶(Camellia yungkiangensis H. T. Chang)分布于贵州省黔东南州月亮山一带,是一种有别于栽培茶树(Camellia sinensis)资源的特异资源,课题组前期对其主要品质化学成分进行检测,结果显示,其混合样品属于典型的“高茶多酚、低咖啡碱、高可可碱”类型资源[
参考文献 2
百度学术    
2]。榕江茶在茶树新品种选育、茶叶新产品开发和茶叶深加工等方面具有很好的开发潜力和利用价值,研究工作的滞后严重制约了该资源的开发和利用。因此,对榕江茶种质资源的品质化学成分和遗传多样性进行分析评价不仅有利于该资源的有效保护和优异种质挖掘,还对充分发挥榕江茶这一具有贵州地方特色的宝贵茶树种质资源的优势具有重要意义。生物体内的生物化学成分及其特征是遗传多样性在生理生化水平的体现之一,茶树的遗传多样性可体现在其生化成分差异上[
参考文献 3-4
3-4],其中水浸出物、茶多酚、氨基酸和咖啡碱对茶叶品质有较大影响[
参考文献 5-6
5-6]。目前,对于贵州茶树种质资源的研究已有较多报道,如牛素贞等[
参考文献 7
百度学术    
7]对144份贵州古茶树种质资源进行了形态学多样性评价,结果表明:除树姿外,其他9个形态性状变异系数均达35%以上,含有较高的遗传多样性指数。陈正武等[
参考文献 8
百度学术    
8]和刘声传等[
参考文献 9
百度学术    
9]对贵州省境内的野生茶树资源进行生化成分测定评价分析,结果表明,贵州野生茶树资源的生化成分变异幅度大,存在丰富的多样性。段学艺等[
参考文献 10
百度学术    
10]对贵州西南部现存大树茶进行生化成分分析,发现贵州西南部各地大树茶的氨基酸含量较低,咖啡碱较高,认为直接栽培利用价值不大,但可作为高咖啡碱、高茶多酚茶树新品种的育种材料。鄢东海等[
参考文献 11
百度学术    
11]采用RAPD分子标记对贵州地方茶树品种群体的遗传差异进行分析,研究结果表明,贵定鸟王茶、都匀毛尖茶、湄潭苔茶和石阡苔茶品种群体内种质间遗传距离的变幅较大、遗传多样性丰富,表明地方品种的遗传变异主要发生在群体内。随后安红卫等[
参考文献 12
百度学术    
12]采用EST-SSR标记探究贵州茶树种质资源的遗传多样性、群体结构及遗传分化,其研究结果同样表明,遗传变异存在于群体内部个体间,且不同群体间存在较强的基因交流,进一步佐证和补充了鄢东海等[
参考文献 11
百度学术    
11]的研究结果。张明泽等[
参考文献 13
百度学术    
13]和郭燕等[
参考文献 14
百度学术    
14]利用SSR分子标记分别对贵州黔南茶树资源、贵州古茶树资源进行DNA遗传多样性分析和分子指纹鉴定,结果均表明,各茶树资源间的遗传差异较大,遗传基础较宽,具有丰富的遗传多样性。以上研究从形态学、生化成分和分子水平上指出贵州茶树种质资源具有丰富的遗传变异[
参考文献 14
百度学术    
14]。这些研究大多集中在栽培茶树种质资源,对其他茶组植物资源的研究较少,尤其是对具有特异性状的资源的研究鲜见报道。对特异茶树种质资源的开发利用是培育优良新品种的关键,同时也是解决当前茶树品种同质化严重、地方特色品种缺乏的关键。鉴定评价榕江茶特异性种质资源等优异地方茶树资源,对优良新品种创新具有重要的意义。茶树种质资源的主要品质化学成分是判定其茶类适制性与品质优劣的基础,虽然在茶树种质资源品质化学成分鉴定及其多样性评价方面已有较多相关研究,但目前未见对榕江茶种质资源品质化学成分及其多样性研究的报道,严重制约了该资源的开发利用进程。本研究以分布在贵州省黔东南州月亮山的121份榕江茶种质资源为材料,对其水浸出物、茶多酚、游离氨基酸等21个主要品质化学成分指标进行检测分析,通过遗传多样性分析、主成分分析、聚类分析、相关性分析等对其品质性状特征和遗传多样性进行评价,并筛选优异资源,为其开发利用和特异茶树新品种培育提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本研究以分布在贵州省黔东南苗族侗族自治州榕江县月亮山境内(平均海拔约1200 m)的121份榕江茶种质资源为研究对象。在实地考察的基础上选取树体直径较大、发芽数较多的单株资源121份,依地理位置分别编号为RJ001~RJ121。于2022年4月采集各单株资源春季第一轮新梢的一芽二叶,经蒸汽杀青后烘至足干,将样品磨碎后密封,置于-20 ℃冰箱内保存备用。

1.2 试验方法

水分、水浸出物、茶多酚、游离氨基酸含量测定分别按照相应的国家标准(GB5009.3—2016、GB/T8305—2013、GB/T8313—2008、GB/T8314—2013);可溶性糖和黄酮的测定分别参照张正竹[

参考文献 15
百度学术    
15]、马陶陶等[
参考文献 16
百度学术    
16]的方法;咖啡碱、可可碱、没食子酸、儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯及表没食子儿茶素没食子酸酯等含量测定参考王丽丽等[
参考文献 17
百度学术    
17]和杨金川等[
参考文献 18
百度学术    
18]的HPLC测定方法,并对其进行优化改良,色谱条件如下:日立PM1000高相液相色谱仪,Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 um),乙腈、甲醇、0.5%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,UV检测波长为278 nm;洗脱梯度见表1,所有实验样品的测定分析重复3次,取其均值。

表1  HPLC洗脱梯度
Table 1  HPLC elution gradient

保留时间(min)

Retention time

0.5%乙酸(%)

0.5% acetic acid

纯乙腈(%)

Pure acetonitrile

纯甲醇(%)

Pure methanol

0 85.00 5.00 10.00
5.00 80.00 6.50 13.50
10.00 85.00 5.00 10.00
20.00 70.00 10.00 20.00
25.00 70.00 10.00 20.00
30.00 72.00 8.00 20.00
32.00 72.00 8.00 20.00
35.00 85.00 5.00 10.00
36.00 85.00 5.00 10.00

1.3 数据处理

遗传多样性采用Shannon-Wiener多样性指数(H')。先对所有数量性状进行10级分类,分别赋值1、2、3……10,1级<X-2s,10级≥X+2s,中间每级间隔0.5s,其中X为平均值,s为标准差。Shannon-Wiener多样性指数计算公式如下:H'=-ΣPjlnPj,式中Pj为某性状第j个代码出现的频率[

参考文献 19
百度学术    
19]。采用SPSS Statistics 23软件进行相关性分析、主成分分析和聚类分析,采用WPS 2019、Origin 2022和PS 2022软件进行绘图、制表。

非酯型儿茶素总量、酯型儿茶素总量、儿茶素品质指数计算公式如下:

非酯型儿茶素总量=儿茶素+表儿茶素+表没食子儿茶素

酯型儿茶素总量=表儿茶素没食子酸酯+表没食子儿茶素没食子酸酯

儿茶素品质指数= ×100%

2 结果与分析

2.1 榕江茶种质资源主要品质化学成分基本统计分析

如表2所示,121份榕江茶种质资源的21个品质化学成分指标的变异系数范围为5.70%~119.69%,平均为32.84%,较陈亮等[

参考文献 20
百度学术    
20]和鄢东海等[
参考文献 21
百度学术    
21]对“国家茶树优良种质评价利用数据库”中的596份资源的生化成分多样性检测结果高。水浸出物、可可碱、茶多酚等3个生化成分的变异系数较小,分别为5.70%、8.53%、9.24%,其中水浸出物平均值为45.76%,说明榕江茶种质资源整体有较高的水浸出物且3个生化成分较稳定;而表没食子儿茶素和儿茶素品质指数的变异系数高达111.36%、119.69%,这两项指标存在丰富的遗传变异类型,可为茶树品质改良提供丰富的材料基础。影响茶叶品质的4种基本生化成分(水浸出物、游离氨基酸、咖啡碱、茶多酚)中,水浸出物变异系数最小,咖啡碱变异系数最大,为43.53%,说明低咖啡碱资源开发利用潜力较大。遗传多样性指数范围为1.47~2.08,平均值为1.95,13个品质成分的遗传多样性指数达2.00以上,说明供试的121份榕江茶种质资源品质化学成分具有丰富的遗传多样性。

表2  121份榕江茶种质资源品质化学成分的描述性统计与遗传多样性指数
Table 2  Descriptive statistics and genetic diversity index of chemical components of 121 Camellia yungkiangensis germplasm resources

序号

No.

生化成分

Biochemical components

最小值

Min.

最大值

Max.

均值

Mean

标准差

SD

变异系数(%)

CV

多样性指数H'

Shannon-Wiener Index

1 茶多酚(%) TP 22.87 39.71 28.44 2.63 9.24 2.04
2 水浸出物(%) WE 38.92 52.88 45.76 2.61 5.70 2.06
3 游离氨基酸(%) AA 1.33 3.36 2.08 0.40 19.21 2.02
4 咖啡碱(μg/g) CAF 32.14 270.45 122.80 53.67 43.53 1.99
5 儿茶素总量(%) TC 6.44 13.07 9.88 1.15 11.63 2.03
6 表儿茶素(%) EC 0.08 0.65 0.25 0.10 41.02 1.94
7 表没食子儿茶素(%) EGC 0.01 1.97 0.23 0.26 111.36 1.56
8 表儿茶素没食子酸酯(%) ECG 0.74 2.29 1.51 0.31 20.58 2.07
9 表没食子儿茶素没食子酸酯(%) EGCG 0.02 0.57 0.23 0.11 45.68 2.06
10 儿茶素(%) C 2.98 6.70 5.05 0.55 10.89 1.99
11 没食子儿茶素没食子酸酯(%) GCG 0.02 0.062 0.04 0.01 24.24 2.03
12 儿茶素没食子酸酯(%) CG 0.02 0.18 0.04 0.02 46.77 1.47
13 没食子酸(%) GA 0.04 0.23 0.11 0.04 38.70 1.94
14 没食子儿茶素(%) GC 1.12 5.17 2.53 0.79 31.30 2.02
15 可可碱(%) TB 2.82 4.85 4.10 0.35 8.53 2.01
16 可溶性糖(%) SS 1.62 5.26 3.24 0.60 18.58 2.04
17 黄酮(%) FLA 0.41 2.98 1.41 0.47 32.89 2.04
18 酯型儿茶素(%) ETC 1.05 2.55 1.74 0.32 18.48 2.08
19 非酯型儿茶素(%) NETC 3.43 7.38 5.53 0.60 10.75 1.99
20 儿茶素品质指数(%) CQI 1.13 171.56 23.35 27.95 119.69 1.56
21 酚氨比 RPAA 8.55 23.32 14.14 2.95 20.86 2.05

WE:Water leachates;AA:Amino acids;TP:Tea polyphenols;SS:Soluble sugars;FLA:Flavonoids;GA:Gallic acid;GC:Gallocatechin;TB:Theobromine;EGC:Epigallocatechin;C:Catechin;CAF:Caffeine;EGCG:Epigallocatechin gallate;EC:Epicatechin;GCG:Gallocatechin gallate;ECG:Epicatechin gallate;CG:Catechin gallate;ETC:Ester type catechin;NETC:Non-ester type catechin;TC:Total catechins;CQI:Catechin quality index;RPAA:Ratio of polyphenol to amino acid;The same as below

2.2 榕江茶种质资源主要品质化学成分的相关性分析

121份榕江茶种质资源的21个生化成分相关性分析(图1)表明,42对性状呈极显著正相关,其中没食子儿茶素与没食子酸,酯型儿茶素与表儿茶素没食子酸酯,非酯型儿茶素与儿茶素,表没食子儿茶素没食子酸酯与没食子儿茶素、没食子酸的相关系数较大,分别为0.95、0.94、0.90、0.89、0.88。14对性状呈显著正相关,相关系数在0.18~0.23之间。10对性状呈极显著负相关,其中酚氨比与游离氨基酸、

图1  榕江茶相关性热图

Fig.1  Correlation heat map of Camellia yungkiangensis

*:在0.05(双尾)水平上相关性显著;**:在0.01(双尾)水平上相关性显著

*: The correlation is significant at the 0.05 level (double tailed); **: Significant correlation at 0.01 level (double tailed)

儿茶素品质指数与表没食子儿茶素负显著相关系数较大,分别为-0.88、-0.51。水浸出物分别与可可碱、咖啡碱、酯型儿茶素、非酯型儿茶素,游离氨基酸与表儿茶素,没食子儿茶素与表儿茶素,可可碱分别与没食子儿茶素没食子酸酯、可溶性糖,表没食子儿茶素与儿茶素,表没食子儿茶素没食子酸酯与没食子儿茶素没食子酸酯共10对性状呈显著负相关。其他性状间无显著相关性。植物体内同一连锁基因群所控制的性状往往表现出相关关系,因此,榕江茶种质资源的呈显著或极显著相关的性状在遗传上可能分属于相同的连锁基因群,在进行品种选育和遗传改良研究时应引以注意。

2.3 榕江茶种质资源主要品质化学成分的主成分分析

主成分分析是利用降维的思想,在损失很少信息的前提下把多个指标转化为几个综合指标的多元统计方法,每个主成分都是原始变量的线性组合,使主成分比原始变量具有某些更优越的性能[

参考文献 22
百度学术    
22]。对21个品质化学成分指标进行主成分分析(表3),按照特征值大于1且贡献率大于5%的原则提取前7个主成分,其累积贡献率达76.84%,包含了原始变量的大部分信息。

表3  总方差解释
Table 3  Total variance explained

序号

No.

特征根

Initial eigenvalues

旋转后的因子解

Rotation sums of squared loadings

特征值

Eigenvalue

贡献率(%)Contribution rate

累积贡献率(%)

Accumulated contribution rate

特征值

Eigenvalue

贡献率(%)

Contribution rate

累积贡献率(%)

Accumulated contribution rate

1 4.68 22.28 22.28 3.72 17.70 17.70
2 3.32 15.83 38.11 2.81 13.37 31.07
3 2.20 10.50 48.61 2.51 11.96 43.03
4 1.78 8.47 57.07 2.28 10.85 53.88
5 1.73 8.25 65.32 1.87 8.92 62.80
6 1.38 6.56 71.88 1.68 8.02 70.82
7 1.04 4.96 76.84 1.27 6.02 76.84
8 0.88 4.17 81.01
9 0.80 3.82 84.84
10 0.70 3.33 88.16
11 0.62 2.97 91.13
12 0.52 2.47 93.60
13 0.48 2.29 95.89
14 0.44 2.09 97.98
15 0.30 1.43 99.41
16 0.07 0.35 99.76
17 0.04 0.17 99.92
18 0.02 0.08 100
19 7.56×10-13 3.60×10-13 100
20 3.38×10-13 1.61×10-13 100
21 1.02×10-13 4.84×10-13 100

旋转后的因子载荷矩阵显示了各原始变量与各主成分之间的相关性(图2),其绝对值越大说明关系越密切。若原始变量在某一主成分中的旋转后的因子载荷的绝对值大于0.5,则将该原始变量归于该主成分中。

图2  因子成分得分及旋转载荷矩阵图

Fig. 2  Matrix diagram of factor component score and rotational load

A为因子成分得分系数,B为旋转后因子载荷系数;PC1~PC7分别为第1~7主成分;成分序号1~21同表2序号

A represents the factor component score coefficient, B represents the factor load coefficient after rotation; PC1-PC7 are the first to seventh principal components, respectively; Component numbers 1-21 are the same as Table 2

从图2B可以看出,第1主成分中没食子酸、没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、儿茶素总量这4个化学成分绝对值均大于0.5,且均呈正相关。说明第1主成分与儿茶素含量是密切相关。第2主成分包含表儿茶素没食子酸酯、酯型儿茶素、茶多酚、可可碱,且均呈正相关,说明第2主成分是与茶多酚密切相关的因子。第3主成分包含非酯型儿茶素、儿茶素,且均呈正相关,说明第3主成分与非酯型儿茶素是密切相关。第4主成分包含酚氨比、游离氨基酸,其中酚氨比呈负相关说明第4主成分与氨基酸含量密切相关。第5主成分包含儿茶素品质指数、表没食子儿茶素,其中表没食子儿茶素呈负相关。第6主成分包含表儿茶素、咖啡碱,其中表儿茶素呈负相关。第7主成分包含可溶性糖、黄酮类,且均呈正相关。

由成分得分系数矩阵(图2A)可以计算出每个单株资源的品质化学成分在这7个主成分上的因子得分(F1~F7)和综合得分,计算公式如下:

F1=0.021×Z1+(-0.042)×Z2+……+0.012×Z21,F2、F3、F4、F5、F6、F7的计算方法同理,Z1~Z21分别为原始变量经过数据标准化后的数值。

综合得分=(a1×F1+a2×F2+a3×F3+a4×F4+a5×F5+a6×F6+a7×F7)/7a,a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7分别为7个主成分的方差贡献率,a为7个主成分的累积贡献率。

综合得分(图3)结果表明,121份榕江茶综合得分在-0.19~0.17,排名前12的资源为:RJ014、RJ017、RJ028、RJ030、RJ049、RJ057、RJ059、RJ069、RJ070、RJ082、RJ092、RJ095,其综合得分在0.10~0.17。结合品质成分分析发现,得分较高的单株在某些化学成分上含量较高(详见https://doi.org/10.13430/ j.cnki.jpgr.20230311001,附表1):一是可溶性糖,如得分最高的RJ014单株,其可溶性糖含量达4%以上。二是儿茶素品质指数,如综合得分排第二的RJ095单株的儿茶素品质指数高达171.56。三是酚氨比,酚氨比高的资源其得分都相对较高,RJ095和RJ049酚氨比分别高达17.82和17.92。

图3  榕江茶单株综合得分图

Fig. 3  Comprehensive score of Camellia yungkiangensis

2.4 榕江茶种质资源主要品质化学成分聚类分析

聚类分析是根据相对独立又有一定相关性指标的相似程度进行分类的一种多元统计分析方法,其能将大量的种质资源进行分类、综合考察[

参考文献 23
百度学术    
23]。聚类结果显示,在欧式距离18.0处,可将121份榕江茶种质资源分为6大类,无独立组存在(图4)。

图4  榕江茶系统聚类图

Fig. 4  Cluster diagram of Camellia yungkiangensis system

由图4和表4可以看出,第Ⅰ类群包含RJ062、RJ077等93份资源,这一类群的品质化学成分的平均值相对其他类群无极值存在,其特征是茶多酚含量、可可碱含量较低,儿茶素品质指数变异系数最高,达110.21%,具有较强的育种创新潜力。第Ⅱ类群包括RJ112、RJ115、RJ068、RJ086、RJ120、RJ037、RJ116、RJ078,共8份资源,在6大类群中可溶性糖含量最高,而茶多酚、黄酮和可可碱含量最低,与其他类群相比育种潜力相对较低。第Ⅲ类群包括RJ001、RJ003、RJ024、RJ067,共4份资源,其特征是黄酮、咖啡碱含量最高,没食子儿茶素含量相对较低。第Ⅳ类群包括RJ107、RJ108、RJ076、RJ080、RJ117、RJ090、RJ095,共7份资源,其特征是茶多酚、儿茶素、儿茶素品质指数和非酯型儿茶素最高,并且此类群成员的品质成分均值在6大类群中无最低极值。第Ⅴ类群包括RJ017、RJ030、RJ019、RJ049,共4份资源,这一类群的特点是酚氨比和儿茶素总量较高,水浸出物、游离氨基酸、可溶性糖含量则最低,依据其酚氨比,此类群最具制备高品质发酵型茶类的潜质,但其水浸出物相对较低,还需对其后期的综合感官表现进行评价。第Ⅵ类群包含RJ008、RJ069、RJ020、RJ014、RJ070,共5份资源,其特征是酚氨比最低,游离氨基酸、没食子儿茶素、可可碱含量最高。

表4  不同类群的品质化学成分统计参数的比较
Table 4  Comparison of statistical parameters of biochemical components among different groups

序号

No.

生化成分

Biochemical components

第Ⅰ类群 Group I第Ⅱ类群 Group Ⅱ第Ⅲ类群 Group Ⅲ第Ⅳ类群 Group Ⅳ第Ⅴ类群 Group Ⅴ第Ⅵ类群 Group Ⅵ

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数(%)CV

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数

(%)CV

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数

(%)CV

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数

(%)CV

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数

(%)CV

平均值±标准差

Mean±SD

变异系数(%)CV
1 茶多酚(%) 28.43±2.62 9.21 26.89±2.31 8.6 27.96±3.22 11.53 29.68±2.54 8.56 29.54±2.31 7.83 28.92±3.09 10.67
2 水浸出物(%) 45.64±2.45 5.36 48.6±3.18 6.54 45.65±1.08 2.37 44.96±2.57 5.72 43.75±1.70 3.88 46.29±3.68 7.95
3 氨基酸(%) 2.08±0.36 17.45 1.88±0.37 19.79 2.29±0.52 22.68 1.88±0.32 16.84 1.78±0.22 12.32 2.86±0.34 12
4 咖啡碱(μg/g) 124.97±54.16 43.34 68.36±44.31 64.82 176.88±35.13 19.86 124.95±46.18 36.96 123.78±28.85 23.31 122.43±42.28 34.53
5 儿茶素总量(%) 9.87±0.78 7.91 7.84±0.77 9.88 8.26±0.70 8.49 10.79±0.69 6.41 12.55±0.66 5.27 11.31±1.06 9.42
6 表儿茶素(%) 0.23±0.08 35.03 0.29±0.07 23.9 0.15±0.04 28.35 0.41±0.14 33.39 0.4±0.17 42.84 0.23±0.11 48.46
7 表没食子儿茶素(%) 0.23±0.20 89.02 0.07±0.04 66.65 0.12±0.17 137.17 0.12±0.16 138.31 0.85±0.76 89.58 0.28±0.19 68.5
8 表儿茶素没食子酸酯(%) 1.48±0.27 18.51 1.18±0.23 19.19 1.26±0.15 11.62 1.81±0.14 7.51 1.91±0.09 4.76 2.06±0.16 7.97
9 表没食子儿茶素没食子酸酯(%) 0.24±0.10 41.93 0.18±0.11 61.74 0.12±0.04 29.13 0.17±0.09 53.96 0.35±0.05 14.9 0.35±0.15 41.87
10 儿茶素(%) 5.07±0.40 7.88 4.21±0.76 18.05 4.77±0.26 5.48 6.06±0.35 5.77 5.33±0.81 15.13 4.61±0.25 5.39
11 没食子儿茶素没食子酸酯(%) 0.04±0.01 23.12 0.04±0.01 23.15 0.04±0.01 28.73 0.05±0.01 19.5 0.03±0.00 13.87 0.03±0.01 28.38
12 儿茶素没食子酸酯(%) 0.04±0.01 23.36 0.03±0.01 28.25 0.08±0.07 78.91 0.04±0.01 13.95 0.06±0.01 20.88 0.06±0.04 69.33
13 没食子酸(%) 0.11±0.04 35.44 0.08±0.03 33.78 0.07±0.02 32.41 0.09±0.03 31.95 0.18±0.04 19.77 0.16±0.04 25.81
14 没食子儿茶素(%) 2.55±0.71 27.7 1.84±0.65 35.35 1.72±0.50 28.82 2.13±0.59 27.61 3.6±0.32 8.8 3.69±1.07 29.06
15 可可碱(%) 4.1±0.29 6.99 3.59±0.43 11.99 3.97±0.42 10.61 4.32±0.37 8.47 4.36±0.21 4.73 4.63±0.23 5.02
16 可溶性糖(%) 3.19±0.59 18.56 3.73±0.86 23 3.41±0.39 11.53 3.28±0.45 13.81 2.99±0.18 5.87 3.41±0.65 19.11
17 黄酮(%) 1.41±0.45 31.99 1.17±0.25 21.73 2.05±0.60 29.45 1.28±0.63 49.28 1.65±0.38 23.09 1.29±0.26 19.9
18 酯型儿茶素(%) 1.71±0.26 15.02 1.35±0.25 18.72 1.38±0.18 13.05 1.98±0.17 8.63 2.26±0.06 2.73 2.41±0.14 5.85
19 非酯型儿茶素(%) 5.53±0.39 7.02 4.57±0.77 16.78 5.04±0.33 6.51 6.59±0.39 5.99 6.59±0.65 9.8 5.11±0.27 5.22
20 儿茶素品质指数(%) 20.03±22.07 110.21 27.02±15.09 55.85 53.22±55.75 104.74 64.48±56.53 87.66 4.39±3.09 70.56 13.09±8.83 67.42
21 酚氨比 14.12±2.91 20.61 14.63±2.38 16.3 12.58±2.66 21.18 16.13±2.83 17.52 16.73±1.15 6.86 10.23±1.58 15.4

2.5 榕江茶种质资源的适制性分析

品质化学成分的含量和比例是影响茶树品种适制性的重要因素,酚氨比是目前普遍认可的判断茶树品种适制性的重要依据。121份榕江茶资源的酚氨比均大于8(图5),其中49个单株资源的酚氨比大于15,72个单株资源介于8~15之间。儿茶素品质指数一定程度上可以反映制茶品质的好坏,儿茶素品质指数越大,茶叶持嫩性越好,特级绿茶的儿茶素品质指数一般大于500.00[

参考文献 24-25
24-25]。榕江茶的儿茶素品质指数最高为171.56(表2),平均为23.35,儿茶素品质指数总体不高,说明榕江茶以绿茶工艺制作成品茶的品质可能不佳。茶多酚类物质是红茶发酵的主体物质,其本身及发酵后的氧化聚合产物决定了红茶的色泽和滋味浓度[
参考文献 26
百度学术    
26]。供试的121份榕江茶资源茶多酚含量最小为22.87%,平均为28.44%,属于高多酚资源。因此从品质化学成分上分析,榕江茶资源可能更适合加工成红茶和发酵茶类。

图5  榕江茶酚氨比

Fig. 5  Phenol-ammonia ratio of Camellia yungkiangensis

2.6 榕江茶优异种质资源的筛选

参照陈亮等[

参考文献 27
百度学术    
27]的判别标准,将茶多酚总量≥20%的资源判定为优良种质资源。按照这一标准,121份榕江茶种质资源均属于高茶多酚含量的优良种质资源,茶多酚含量平均为28.44%(表2)。72份榕江茶单株资源具有高茶多酚和高水浸出物(≥45%)的特征,占供试材料的59.50%,表明榕江茶种质资源的内含物质丰富,其中有7个单株资源(RJ119、RJ098、RJ120、RJ036、RJ115、RJ070、RJ112)的水浸出物含量≥50%,有5个单株资源(RJ004、RJ057、RJ066、RJ070、RJ102)茶多酚含量≥33%,这些单株资源可作为今后开发高茶多酚、高水浸出物等优异资源的备选材料。供试的121份榕江茶种质资源的可可碱含量为2.82%~4.85%,平均为4.10%,咖啡碱含量为32.14~270.45 μg/g,平均为122.80 μg/g(约0.012%)。按照茶树特异种质资源的判别标准,121份榕江茶种质资源均属于低咖啡碱(≤1.5%)、高可可碱(≥2.5%)类型的特异资源,其中可可碱含量4.0%以上的单株资源有78份。植物体内的可溶性糖等被认为抗冻物质[
参考文献 28-29
28-29],抗寒性强的茶树可溶性糖含量相对较高[
参考文献 30-31
30-31],供试的121份资源可溶性糖含量介于1.61%~5.26%之间,平均为3.24%,可溶性糖含量最高的单株资源是RJ115,为5.26%。因此,榕江茶种质资源可以作为高茶多酚、低咖啡碱、高可可碱和高可溶性糖特异茶树新品种选育的优质资源库。

3 讨论

通过对121份榕江茶种质资源主要品质化学成分的测定与分析,发现榕江茶种质资源的主要化学成分有较高的遗传多样性和变异系数,遗传多样性指数均值达1.95;变异系数和变异幅度均较大,均值达32.84%,远高于宁静等[

参考文献 32
百度学术    
32]对湖南城步峒茶资源的研究结果、王新超等[
参考文献 33
百度学术    
33]对广西茶树资源的研究结果和蒋会兵等[
参考文献 34
百度学术    
34]对云南地方品种茶树资源的研究结果,表明121份榕江茶种质资源有很大的选择潜力和丰富的多样性。

聚类分析表明,在欧式距离18.0处,121份榕江茶种质资源分为6大类群。在6大类群中,第一大类群的儿茶素品质指数的变异系数高达110.21%,此类群在红、绿茶兼制品种创新中具有较大的育种潜力。相对于其他类群,第五大类群的儿茶素总量和酚氨比最高,可作为今后开发高品质红茶的优选原料。酚氨比是判定茶树资源适制性的一个指标,早期认为酚氨比小于8适制绿茶,大于15适制红茶[

参考文献 35
百度学术    
35]。这一判定标准是依据旧版茶多酚检测国家标准(GB/T 8313—1987和GB/T 8313—2002)制定。研究表明,新版茶多酚检测国家标准(GB/T 8313—2018)相较于旧版国家标准(GB/T 8313—1987和GB/T 8313—2002),同一样品的茶多酚含量的检测结果降低了30%~40%[
参考文献 36-37
36-37]。因此,在新版茶多酚检测国家标准背景下,应对茶叶适制性判别的酚氨比判别值的大小作适当调整。综合各项数据及其他学者的研究结果认为,酚氨比调整为小于4.5适制绿茶,大于6.5适制红茶比较科学。根据这一判别标准,121份榕江茶种质资源全都适制红茶。榕江茶茶多酚含量最小为22.87%,平均为28.44%,属于高多酚资源。茶多酚类物质是红茶发酵的主体物质,其本身及发酵后的氧化聚合产物决定了红茶的色泽和滋味浓度,因此榕江茶更适加工制成红茶和发酵茶类。

榕江茶种质资源的简单儿茶素如C(5.05%)的含量较高,而复杂儿茶素如EGCG(0.23%)的含量较低,一定程度上呈现出野生茶的特征。榕江茶种质资源的咖啡碱含量平均为122.80μg/g,茶多酚含量平均为28.44%,水浸出物45.76%,与重庆[

参考文献 38
百度学术    
38]、湖南[
参考文献 39
百度学术    
39]、陕西[
参考文献 40
百度学术    
40]等栽培型茶树(Camellia sinensis)资源相比较,其咖啡碱含量极低、氨基酸含量偏低、茶多酚和水浸出物含量各有高低。榕江茶种质资源的氨基酸均值含量较低,考虑到榕江茶生境的特殊性,对榕江茶种质资源的评价最好结合驯化栽培后的表现,在后续育种或基础研究应用中要重点关注其高水浸出物、茶多酚、低咖啡碱等优点,从而使资源优势最大发挥。主成分分析将21个生化成分指标转化为7个主成分,筛选出综合得分较高的12份种质资源,表明这12份种质资源在7个主成分中具有含量较高、均衡的特性,后期将结合成品茶感官审评,进一步综合分析其优良特性;从121份种质资源中筛选出7个单株资源的水浸出物含量≥50%,5个单株资源茶多酚含量≥33%,78份可可碱含量4.0%以上的单株资源,可溶性糖含量最高的单株资源是RJ115,达5.26%,这些单株资源可作为今后开发高茶多酚、高水浸出物、高可可碱、高可溶性糖等特异资源的备选材料。

4 结论

榕江茶种质资源的生化成分多样性丰富,变异系数大,具有丰富的遗传多样性和明显的地域独特性。以主成分分析进行综合得分分析,初步筛选出的RJ014、RJ017、RJ028、RJ030、RJ049、RJ057、RJ059、RJ069、RJ070、RJ082、RJ092、RJ095等12份综合得分较高资源及高茶多酚、高水浸出物、高可可碱、高可溶性糖等特异资源,可作为茶叶深加工和育种的基础材料开发利用。

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