摘要
本研究分析了贵州特异茶树种质资源——榕江茶的品质化学成分特征及其遗传多样性,为其开发利用和特异茶树新品种培育提供科学依据。以分布在贵州省黔东南州月亮山的121份榕江茶种质资源为材料,对其水浸出物、茶多酚、游离氨基酸等21个主要品质化学成分指标进行检测分析,通过遗传多样性分析、主成分分析、聚类分析、相关性分析等对其品质性状特征和遗传多样性进行评价,并对其中的优异资源进行筛选。121份资源的21个品质化学成分指标的变异系数为5.70%~119.69%,平均为32.84%,遗传多样性指数为1.47~2.08,平均为1.95。21个品质化学成分指标的相关性分析结果显示,呈极显著正相关有42对性状,呈显著正相关的有14对,呈极显著负相关的有10对,呈显著负相关的有10对。主成分分析表明,前7个主成分特征值均大于1,且累计贡献率达76.84%,包含了原始变量的绝大部分信息,以因子得分系数矩阵求得每个单株资源的品质化学成分在各主成分上的综合得分,筛选出了12份品质化学成分综合得分高的单株资源。聚类分析显示,在欧式距离18.0处,可将121份榕江茶种质资源分为6个类群。优异种质资源筛选结果显示,121份榕江茶种质资源均属于高茶多酚(≥20.0%)、低咖啡碱(≤1.5%)、高可可碱(≥2.5%)类型的资源,其中高茶多酚(≥20.0%)、高水浸出物(≥45%)的特异类型资源有72份。榕江茶种质资源是高茶多酚、低咖啡碱、高可可碱类型的资源,其品质化学成分具有丰富的遗传多样性,具有培育特异茶树新品种的潜力。
茶树种质资源是品种创新和生物技术研究的物质基础,也是保障茶产业高质量发展的战略性资源,具有十分重要的价值和意
本研究以分布在贵州省黔东南苗族侗族自治州榕江县月亮山境内(平均海拔约1200 m)的121份榕江茶种质资源为研究对象。在实地考察的基础上选取树体直径较大、发芽数较多的单株资源121份,依地理位置分别编号为RJ001~RJ121。于2022年4月采集各单株资源春季第一轮新梢的一芽二叶,经蒸汽杀青后烘至足干,将样品磨碎后密封,置于-20 ℃冰箱内保存备用。
水分、水浸出物、茶多酚、游离氨基酸含量测定分别按照相应的国家标准(GB5009.3—2016、GB/T8305—2013、GB/T8313—2008、GB/T8314—2013);可溶性糖和黄酮的测定分别参照张正
保留时间(min) Retention time | 0.5%乙酸(%) 0.5% acetic acid | 纯乙腈(%) Pure acetonitrile | 纯甲醇(%) Pure methanol |
---|---|---|---|
0 | 85.00 | 5.00 | 10.00 |
5.00 | 80.00 | 6.50 | 13.50 |
10.00 | 85.00 | 5.00 | 10.00 |
20.00 | 70.00 | 10.00 | 20.00 |
25.00 | 70.00 | 10.00 | 20.00 |
30.00 | 72.00 | 8.00 | 20.00 |
32.00 | 72.00 | 8.00 | 20.00 |
35.00 | 85.00 | 5.00 | 10.00 |
36.00 | 85.00 | 5.00 | 10.00 |
遗传多样性采用Shannon-Wiener多样性指数(H')。先对所有数量性状进行10级分类,分别赋值1、2、3……10,1级<X-2s,10级≥X+2s,中间每级间隔0.5s,其中X为平均值,s为标准差。Shannon-Wiener多样性指数计算公式如下:H'=-ΣPjlnPj,式中Pj为某性状第j个代码出现的频
非酯型儿茶素总量、酯型儿茶素总量、儿茶素品质指数计算公式如下:
非酯型儿茶素总量=儿茶素+表儿茶素+表没食子儿茶素
酯型儿茶素总量=表儿茶素没食子酸酯+表没食子儿茶素没食子酸酯
儿茶素品质指数=
如
序号 No. | 生化成分 Biochemical components | 最小值 Min. | 最大值 Max. | 均值 Mean | 标准差 SD | 变异系数(%) CV | 多样性指数H' Shannon-Wiener Index |
---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | 茶多酚(%) TP | 22.87 | 39.71 | 28.44 | 2.63 | 9.24 | 2.04 |
2 | 水浸出物(%) WE | 38.92 | 52.88 | 45.76 | 2.61 | 5.70 | 2.06 |
3 | 游离氨基酸(%) AA | 1.33 | 3.36 | 2.08 | 0.40 | 19.21 | 2.02 |
4 | 咖啡碱(μg/g) CAF | 32.14 | 270.45 | 122.80 | 53.67 | 43.53 | 1.99 |
5 | 儿茶素总量(%) TC | 6.44 | 13.07 | 9.88 | 1.15 | 11.63 | 2.03 |
6 | 表儿茶素(%) EC | 0.08 | 0.65 | 0.25 | 0.10 | 41.02 | 1.94 |
7 | 表没食子儿茶素(%) EGC | 0.01 | 1.97 | 0.23 | 0.26 | 111.36 | 1.56 |
8 | 表儿茶素没食子酸酯(%) ECG | 0.74 | 2.29 | 1.51 | 0.31 | 20.58 | 2.07 |
9 | 表没食子儿茶素没食子酸酯(%) EGCG | 0.02 | 0.57 | 0.23 | 0.11 | 45.68 | 2.06 |
10 | 儿茶素(%) C | 2.98 | 6.70 | 5.05 | 0.55 | 10.89 | 1.99 |
11 | 没食子儿茶素没食子酸酯(%) GCG | 0.02 | 0.062 | 0.04 | 0.01 | 24.24 | 2.03 |
12 | 儿茶素没食子酸酯(%) CG | 0.02 | 0.18 | 0.04 | 0.02 | 46.77 | 1.47 |
13 | 没食子酸(%) GA | 0.04 | 0.23 | 0.11 | 0.04 | 38.70 | 1.94 |
14 | 没食子儿茶素(%) GC | 1.12 | 5.17 | 2.53 | 0.79 | 31.30 | 2.02 |
15 | 可可碱(%) TB | 2.82 | 4.85 | 4.10 | 0.35 | 8.53 | 2.01 |
16 | 可溶性糖(%) SS | 1.62 | 5.26 | 3.24 | 0.60 | 18.58 | 2.04 |
17 | 黄酮(%) FLA | 0.41 | 2.98 | 1.41 | 0.47 | 32.89 | 2.04 |
18 | 酯型儿茶素(%) ETC | 1.05 | 2.55 | 1.74 | 0.32 | 18.48 | 2.08 |
19 | 非酯型儿茶素(%) NETC | 3.43 | 7.38 | 5.53 | 0.60 | 10.75 | 1.99 |
20 | 儿茶素品质指数(%) CQI | 1.13 | 171.56 | 23.35 | 27.95 | 119.69 | 1.56 |
21 | 酚氨比 RPAA | 8.55 | 23.32 | 14.14 | 2.95 | 20.86 | 2.05 |
WE:Water leachates;AA:Amino acids;TP:Tea polyphenols;SS:Soluble sugars;FLA:Flavonoids;GA:Gallic acid;GC:Gallocatechin;TB:Theobromine;EGC:Epigallocatechin;C:Catechin;CAF:Caffeine;EGCG:Epigallocatechin gallate;EC:Epicatechin;GCG:Gallocatechin gallate;ECG:Epicatechin gallate;CG:Catechin gallate;ETC:Ester type catechin;NETC:Non-ester type catechin;TC:Total catechins;CQI:Catechin quality index;RPAA:Ratio of polyphenol to amino acid;The same as below
121份榕江茶种质资源的21个生化成分相关性分析(

图1 榕江茶相关性热图
Fig.1 Correlation heat map of Camellia yungkiangensis
*:在0.05(双尾)水平上相关性显著;**:在0.01(双尾)水平上相关性显著
*: The correlation is significant at the 0.05 level (double tailed); **: Significant correlation at 0.01 level (double tailed)
儿茶素品质指数与表没食子儿茶素负显著相关系数较大,分别为-0.88、-0.51。水浸出物分别与可可碱、咖啡碱、酯型儿茶素、非酯型儿茶素,游离氨基酸与表儿茶素,没食子儿茶素与表儿茶素,可可碱分别与没食子儿茶素没食子酸酯、可溶性糖,表没食子儿茶素与儿茶素,表没食子儿茶素没食子酸酯与没食子儿茶素没食子酸酯共10对性状呈显著负相关。其他性状间无显著相关性。植物体内同一连锁基因群所控制的性状往往表现出相关关系,因此,榕江茶种质资源的呈显著或极显著相关的性状在遗传上可能分属于相同的连锁基因群,在进行品种选育和遗传改良研究时应引以注意。
主成分分析是利用降维的思想,在损失很少信息的前提下把多个指标转化为几个综合指标的多元统计方法,每个主成分都是原始变量的线性组合,使主成分比原始变量具有某些更优越的性
序号 No. | 特征根 Initial eigenvalues | 旋转后的因子解 Rotation sums of squared loadings | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
特征值 Eigenvalue | 贡献率(%)Contribution rate | 累积贡献率(%) Accumulated contribution rate | 特征值 Eigenvalue | 贡献率(%) Contribution rate | 累积贡献率(%) Accumulated contribution rate | |
1 | 4.68 | 22.28 | 22.28 | 3.72 | 17.70 | 17.70 |
2 | 3.32 | 15.83 | 38.11 | 2.81 | 13.37 | 31.07 |
3 | 2.20 | 10.50 | 48.61 | 2.51 | 11.96 | 43.03 |
4 | 1.78 | 8.47 | 57.07 | 2.28 | 10.85 | 53.88 |
5 | 1.73 | 8.25 | 65.32 | 1.87 | 8.92 | 62.80 |
6 | 1.38 | 6.56 | 71.88 | 1.68 | 8.02 | 70.82 |
7 | 1.04 | 4.96 | 76.84 | 1.27 | 6.02 | 76.84 |
8 | 0.88 | 4.17 | 81.01 | |||
9 | 0.80 | 3.82 | 84.84 | |||
10 | 0.70 | 3.33 | 88.16 | |||
11 | 0.62 | 2.97 | 91.13 | |||
12 | 0.52 | 2.47 | 93.60 | |||
13 | 0.48 | 2.29 | 95.89 | |||
14 | 0.44 | 2.09 | 97.98 | |||
15 | 0.30 | 1.43 | 99.41 | |||
16 | 0.07 | 0.35 | 99.76 | |||
17 | 0.04 | 0.17 | 99.92 | |||
18 | 0.02 | 0.08 | 100 | |||
19 |
7.56×1 |
3.60×1 | 100 | |||
20 |
3.38×1 |
1.61×1 | 100 | |||
21 |
1.02×1 |
4.84×1 | 100 |
旋转后的因子载荷矩阵显示了各原始变量与各主成分之间的相关性(

图2 因子成分得分及旋转载荷矩阵图
Fig. 2 Matrix diagram of factor component score and rotational load
A为因子成分得分系数,B为旋转后因子载荷系数;PC1~PC7分别为第1~7主成分;成分序号1~21同表2序号
A represents the factor component score coefficient, B represents the factor load coefficient after rotation; PC1-PC7 are the first to seventh principal components, respectively; Component numbers 1-21 are the same as Table 2
从
由成分得分系数矩阵(
F1=0.021×Z1+(-0.042)×Z2+……+0.012×Z21,F2、F3、F4、F5、F6、F7的计算方法同理,Z1~Z21分别为原始变量经过数据标准化后的数值。
综合得分=(a1×F1+a2×F2+a3×F3+a4×F4+a5×F5+a6×F6+a7×F7)/7a,a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7分别为7个主成分的方差贡献率,a为7个主成分的累积贡献率。
综合得分(

图3 榕江茶单株综合得分图
Fig. 3 Comprehensive score of Camellia yungkiangensis
聚类分析是根据相对独立又有一定相关性指标的相似程度进行分类的一种多元统计分析方法,其能将大量的种质资源进行分类、综合考

图4 榕江茶系统聚类图
Fig. 4 Cluster diagram of Camellia yungkiangensis system
由
序号 No. | 生化成分 Biochemical components | 第Ⅰ类群 Group I | 第Ⅱ类群 Group Ⅱ | 第Ⅲ类群 Group Ⅲ | 第Ⅳ类群 Group Ⅳ | 第Ⅴ类群 Group Ⅴ | 第Ⅵ类群 Group Ⅵ | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数(%)CV | 平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数 (%)CV | 平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数 (%)CV | 平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数 (%)CV | 平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数 (%)CV | 平均值±标准差 Mean±SD | 变异系数(%)CV | ||
1 | 茶多酚(%) | 28.43±2.62 | 9.21 | 26.89±2.31 | 8.6 | 27.96±3.22 | 11.53 | 29.68±2.54 | 8.56 | 29.54±2.31 | 7.83 | 28.92±3.09 | 10.67 |
2 | 水浸出物(%) | 45.64±2.45 | 5.36 | 48.6±3.18 | 6.54 | 45.65±1.08 | 2.37 | 44.96±2.57 | 5.72 | 43.75±1.70 | 3.88 | 46.29±3.68 | 7.95 |
3 | 氨基酸(%) | 2.08±0.36 | 17.45 | 1.88±0.37 | 19.79 | 2.29±0.52 | 22.68 | 1.88±0.32 | 16.84 | 1.78±0.22 | 12.32 | 2.86±0.34 | 12 |
4 | 咖啡碱(μg/g) | 124.97±54.16 | 43.34 | 68.36±44.31 | 64.82 | 176.88±35.13 | 19.86 | 124.95±46.18 | 36.96 | 123.78±28.85 | 23.31 | 122.43±42.28 | 34.53 |
5 | 儿茶素总量(%) | 9.87±0.78 | 7.91 | 7.84±0.77 | 9.88 | 8.26±0.70 | 8.49 | 10.79±0.69 | 6.41 | 12.55±0.66 | 5.27 | 11.31±1.06 | 9.42 |
6 | 表儿茶素(%) | 0.23±0.08 | 35.03 | 0.29±0.07 | 23.9 | 0.15±0.04 | 28.35 | 0.41±0.14 | 33.39 | 0.4±0.17 | 42.84 | 0.23±0.11 | 48.46 |
7 | 表没食子儿茶素(%) | 0.23±0.20 | 89.02 | 0.07±0.04 | 66.65 | 0.12±0.17 | 137.17 | 0.12±0.16 | 138.31 | 0.85±0.76 | 89.58 | 0.28±0.19 | 68.5 |
8 | 表儿茶素没食子酸酯(%) | 1.48±0.27 | 18.51 | 1.18±0.23 | 19.19 | 1.26±0.15 | 11.62 | 1.81±0.14 | 7.51 | 1.91±0.09 | 4.76 | 2.06±0.16 | 7.97 |
9 | 表没食子儿茶素没食子酸酯(%) | 0.24±0.10 | 41.93 | 0.18±0.11 | 61.74 | 0.12±0.04 | 29.13 | 0.17±0.09 | 53.96 | 0.35±0.05 | 14.9 | 0.35±0.15 | 41.87 |
10 | 儿茶素(%) | 5.07±0.40 | 7.88 | 4.21±0.76 | 18.05 | 4.77±0.26 | 5.48 | 6.06±0.35 | 5.77 | 5.33±0.81 | 15.13 | 4.61±0.25 | 5.39 |
11 | 没食子儿茶素没食子酸酯(%) | 0.04±0.01 | 23.12 | 0.04±0.01 | 23.15 | 0.04±0.01 | 28.73 | 0.05±0.01 | 19.5 | 0.03±0.00 | 13.87 | 0.03±0.01 | 28.38 |
12 | 儿茶素没食子酸酯(%) | 0.04±0.01 | 23.36 | 0.03±0.01 | 28.25 | 0.08±0.07 | 78.91 | 0.04±0.01 | 13.95 | 0.06±0.01 | 20.88 | 0.06±0.04 | 69.33 |
13 | 没食子酸(%) | 0.11±0.04 | 35.44 | 0.08±0.03 | 33.78 | 0.07±0.02 | 32.41 | 0.09±0.03 | 31.95 | 0.18±0.04 | 19.77 | 0.16±0.04 | 25.81 |
14 | 没食子儿茶素(%) | 2.55±0.71 | 27.7 | 1.84±0.65 | 35.35 | 1.72±0.50 | 28.82 | 2.13±0.59 | 27.61 | 3.6±0.32 | 8.8 | 3.69±1.07 | 29.06 |
15 | 可可碱(%) | 4.1±0.29 | 6.99 | 3.59±0.43 | 11.99 | 3.97±0.42 | 10.61 | 4.32±0.37 | 8.47 | 4.36±0.21 | 4.73 | 4.63±0.23 | 5.02 |
16 | 可溶性糖(%) | 3.19±0.59 | 18.56 | 3.73±0.86 | 23 | 3.41±0.39 | 11.53 | 3.28±0.45 | 13.81 | 2.99±0.18 | 5.87 | 3.41±0.65 | 19.11 |
17 | 黄酮(%) | 1.41±0.45 | 31.99 | 1.17±0.25 | 21.73 | 2.05±0.60 | 29.45 | 1.28±0.63 | 49.28 | 1.65±0.38 | 23.09 | 1.29±0.26 | 19.9 |
18 | 酯型儿茶素(%) | 1.71±0.26 | 15.02 | 1.35±0.25 | 18.72 | 1.38±0.18 | 13.05 | 1.98±0.17 | 8.63 | 2.26±0.06 | 2.73 | 2.41±0.14 | 5.85 |
19 | 非酯型儿茶素(%) | 5.53±0.39 | 7.02 | 4.57±0.77 | 16.78 | 5.04±0.33 | 6.51 | 6.59±0.39 | 5.99 | 6.59±0.65 | 9.8 | 5.11±0.27 | 5.22 |
20 | 儿茶素品质指数(%) | 20.03±22.07 | 110.21 | 27.02±15.09 | 55.85 | 53.22±55.75 | 104.74 | 64.48±56.53 | 87.66 | 4.39±3.09 | 70.56 | 13.09±8.83 | 67.42 |
21 | 酚氨比 | 14.12±2.91 | 20.61 | 14.63±2.38 | 16.3 | 12.58±2.66 | 21.18 | 16.13±2.83 | 17.52 | 16.73±1.15 | 6.86 | 10.23±1.58 | 15.4 |
品质化学成分的含量和比例是影响茶树品种适制性的重要因素,酚氨比是目前普遍认可的判断茶树品种适制性的重要依据。121份榕江茶资源的酚氨比均大于8(

图5 榕江茶酚氨比
Fig. 5 Phenol-ammonia ratio of Camellia yungkiangensis
参照陈亮
通过对121份榕江茶种质资源主要品质化学成分的测定与分析,发现榕江茶种质资源的主要化学成分有较高的遗传多样性和变异系数,遗传多样性指数均值达1.95;变异系数和变异幅度均较大,均值达32.84%,远高于宁静
聚类分析表明,在欧式距离18.0处,121份榕江茶种质资源分为6大类群。在6大类群中,第一大类群的儿茶素品质指数的变异系数高达110.21%,此类群在红、绿茶兼制品种创新中具有较大的育种潜力。相对于其他类群,第五大类群的儿茶素总量和酚氨比最高,可作为今后开发高品质红茶的优选原料。酚氨比是判定茶树资源适制性的一个指标,早期认为酚氨比小于8适制绿茶,大于15适制红
榕江茶种质资源的简单儿茶素如C(5.05%)的含量较高,而复杂儿茶素如EGCG(0.23%)的含量较低,一定程度上呈现出野生茶的特征。榕江茶种质资源的咖啡碱含量平均为122.80μg/g,茶多酚含量平均为28.44%,水浸出物45.76%,与重
榕江茶种质资源的生化成分多样性丰富,变异系数大,具有丰富的遗传多样性和明显的地域独特性。以主成分分析进行综合得分分析,初步筛选出的RJ014、RJ017、RJ028、RJ030、RJ049、RJ057、RJ059、RJ069、RJ070、RJ082、RJ092、RJ095等12份综合得分较高资源及高茶多酚、高水浸出物、高可可碱、高可溶性糖等特异资源,可作为茶叶深加工和育种的基础材料开发利用。
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