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薏苡雌性不育株FS2106的性状遗传分析  PDF

    李祥栋
    ✉
    陆秀娟
    魏心元
    潘虹
    曾涛
    石明
黔西南州农业林业科学研究院/贵州省薏苡工程技术研究中心, 兴义 562400

最近更新:2024-07-04

DOI:10.13430/j.cnki.jpgr.20240111001

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目录contents
摘要
关键词
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 试验方法
1.3 数据分析
2 结果与分析
2.1 雌性不育株FS2106的发现及表型特征
2.2 FS2106植株雌性不育性的遗传方式与性状分离
2.3 FS2106植株柱头颜色性状的遗传方式与性状分离
2.4 FS2106植株叶鞘颜色性状的遗传方式与性状分离
2.5 FS2106植株总苞质地性状的遗传方式与性状分离
3 讨论
3.1 薏苡雌性不育资源(基因)的发现与利用价值
3.2 薏苡重要标记性状的遗传规律解析及育种应用
参考文献

摘要

稳定遗传的雌性不育系是薏苡实现杂种优势利用的关键,雌性不育基因的利用也是实现轻简化杂交种制种的重要途径。本研究团队在资源鉴定过程中首次发现了在自然条件下产生的薏苡雌性不育遗传材料FS2106。以FS2106为试验材料,对其表型、花粉活力和染色体数目进行鉴定,以其为父本与2个可育薏苡材料配制杂交组合,观测雌性不育性、柱头颜色、叶鞘颜色和总苞质地4个性状在F1、F2群体中的性状分离情况,并通过χ2检验揭示其遗传方式和遗传规律。结果表明,FS2106植株的株高、茎粗、分蘖数、叶长和叶宽的平均值分别为86.9 cm、4.9 mm、33.4 个/株、34.3 cm和2.2 cm;开花期雌穗不发育、雄穗发育正常,产生正常活力花粉,雌性不育性状稳定;染色体数目为2n=20,倍性正常。χ2检验显示,FS2106植株的雌性不育性属于单基因控制的隐性核遗传,其紫色叶鞘、紫色柱头颜色、总苞质地性状均为单基因显性遗传,而且总苞质地性状位点表现为杂合子。FS2106的发现及其雌性不育基因的挖掘为薏苡杂种优势利用和杂交制种提供了基础材料,叶鞘颜色、柱头颜色和总苞质地性状也可做为育种应用的重要标记性状。

关键词

雌性不育; 标记性状; 控制基因; 遗传规律; 薏苡

雌性不育与雄性不育突变体往往作为重要工具用于各种作物的杂交育种和杂种优势利用,而雌、雄不育现象及其发生机理的阐明对深刻理解植物性别决定、分化和遗传演化均具有重要意义。得益于雄性不育系的发现和两系、三系配套法的利用,目前杂种优势已在多种作物中利用,如水稻、谷子、油菜等,并实现了产量的大幅度提升。除了雄性不育性,自然界中的植物还存在雌性器官发育不良,失去生殖功能,导致不育特性的现象,即雌性不育,其突变体在水稻[

参考文献 1-2
1-2]、小麦[
参考文献 3-5
3-5]等作物中均有发现。薏苡(C. lacryma-jobi)属于禾本科薏苡属(Coix L.),为一年生或多年生的草本植物,自古被列为上品,是药食同源的典型代表,其脱壳之后的种仁具有抗肿瘤、降血糖、抑制肿瘤血管生成及提高免疫力等多种药理作用[
参考文献 6-7
6-7]。种质资源是现代育种的基础,而关键的稀有特异种质对于作物育种成效往往具有决定性的作用。中国薏苡的系统描述和鉴定评价,起步于“八五”期间的国家攻关项目“黔南桂西作物种质资源考察”,截至2024年,在薏苡资源表型[
参考文献 8-10
8-10]、品质[
参考文献 11-12
11-12]、分子标记多样性[
参考文献 13-15
13-15]等方面均有较多报道,而薏苡资源的利用和品种选育多停留于地方品种的优中选优及提纯复壮的系统选育阶段。在薏苡的遗传分析方面,前人在薏苡种间杂交[
参考文献 16-18
16-18]和近缘物种(玉米、摩擦禾和大刍草)的远缘杂交[
参考文献 19
百度学术    
19]方面均作出了诸多有益探索。川谷和薏苡种间杂交试验表明,其后代F1在形态性状、生长势、生物产量上均表现出远缘杂交和超亲性状特征[
参考文献 20-21
20-21]。本研究团队前期研究[
参考文献 22
百度学术    
22]也表明,薏苡总苞性状(质地、颜色、喙和纵长条纹)及部分颜色性状(芽鞘色、叶鞘色、苗期叶色、柱头颜色)均表现为1~2对基因控制的质量性状,可作为薏苡遗传改良的重要标记性状。长期以来,薏苡作为一种小宗的区域性特色作物,在生产上仍种植常规种,并没有像玉米、水稻那样经历两次绿色革命(矮秆基因、杂种优势利用)而有效突破产量瓶颈,其单产水平一直不高;而雌性不育株的发现和利用,则是薏苡实现杂交育种和制种的重要技术突破口。本研究团队在开展薏苡种质资源鉴定评价过程中,首次发现了在自然条件下完全不具备雌性器官类型的薏苡全雄花雌性不育突变株,并对此展开了表型鉴定和重要性状的遗传分析,以期深入了解雌性不育植株的表型特征和重要性状遗传规律,为薏苡的杂交育种提供理论支撑和材料基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料

雌性不育突变株FS2106为父本;2个多年提纯的具有正常育性的自交系CL84和JF19-41为母本。以上供试亲本材料均为本研究团队连续6代以上自交选育的稳定自交系,信息见表1。

表1  亲本材料信息
Table 1  Details of parent materials

品系

Lines

叶鞘颜色

Leaf sheath color

柱头颜色

Stigma color

总苞质地

Involurce texture

雌穗育性

Female fertility

来源

Origin

FS2106 紫红色 - - 不育 湖南
CL84 紫红色 紫红色 甲壳质 可育 贵州
JF19-41 绿色 白色 甲壳质 可育 河北

-表示由于花器官缺失而不表现

- were traits no appear because of floral organs absence

1.2 试验方法

1.2.1 雌性不育株FS2106的表型调查

参考《薏苡种质资源描述规范和数据标准》[

参考文献 23
百度学术    
23],于2021-2023年在贵州省兴义市木贾试验基地种植,采用分蔸的方式繁殖雌性不育株FS2106,连续3年观测其主要农艺性状,包括株高、茎粗、叶长、叶宽、分蘖性、出苗至抽穗天数、叶鞘颜色、叶片颜色、叶缘颜色、茎秆颜色、苞状鞘颜色、花药颜色及育性,CL84和JF19-41一起种植作为对照。

1.2.2 雌性不育株FS2106的花粉活力及染色体倍性分析

在盛花期上午9:00-10:00散粉之前分别摘取薏苡FS2106的穗部数份,剥开花药将花粉置于载玻片上,滴入1% I2-KI 染液制片,在100倍光学显微镜下观察FS2106的花粉粒形态,以判断其花粉活力;参照植物染色体核型分析方法[

参考文献 24
百度学术    
24],选取幼嫩的根尖进行预处理、固定、解离、染色和制片处理,显微观察其染色体数目与倍性。

1.2.3 亲本间杂交组配及遗传分析

2021年,在贵州省兴义市黔西南州农科所实验基地种植亲本材料,以可育材料CL84和JF19-41为母本,FS2106为父本进行杂交,获得2组F1,2022年F1自交收获F2种子,2023年播种获得F2分离群体,在整个生长期观察亲本及杂交组合的F1和F2植株,记录不同植株的雌穗育性、柱头颜色、叶鞘颜色和总苞质地特征。

1.3 数据分析

利用Excel 2003对统计的数据进行χ2测验,检验各性状的理论分离比例与实际分离比例的符合度,分析雌穗育性、柱头颜色、叶鞘颜色和总苞质地的遗传规律。采用矫正后的χ2计算符合度:χ2=∑(A-T-0.52)T,A为实际观测株数,T为理论株数。

2 结果与分析

2.1 雌性不育株FS2106的发现及表型特征

2021年,在采集编号为2106(地理来源于湖南)的野生资源地块中,发现一份薏苡雌性不育株。当年利用分蔸繁育方法对该植株进行保护,连续3年对其主要农艺性状和雌性不育性状进行鉴定,并将其命名为FS2106。表型鉴定结果显示,其株高、茎粗、分蘖数、叶长和叶宽的平均值分别为86.9 cm、4.9 mm、33.4个/株、34.3 cm和2.2 cm(表2);叶型狭长,叶片绿色、叶缘紫红色,苞状鞘浅紫色,茎秆具蜡粉、浅紫色;出苗至抽穗天数平均61.3 d;FS2106植株无总苞、子房、花柱等雌性器官,即穗柄上不存在雌小穗、只有雄小穗,在3个生长周期内均表现为100%的雌性不育,说明其雌性不育特征稳定遗传;其雄花外观性状与其他可育植株无异,有正常雄蕊,具黄色花药、可正常散粉。镜检发现大部分花粉粒染色为褐色、圆粒、饱满,为可育花粉粒;染色体数目正常,为2n=20(图1)。

表 2  FS2106植株的农艺性状表现
Table 2  Agronomic performance of FS2106 plants

年份

Year

株高(cm)

Plant height

茎粗(mm)

Stem diameter

分蘖数

Tillers number

叶长(cm)

Leaf lengh

叶宽(cm)

Leaf width

出苗至抽穗天数(d)

Days of ergence to heading

2021 95.0 5.0 38.0 30.5 2.3 66.0
2022 84.0 4.6 36.0 40.5 2.3 56.0
2023 81.7 5.2 26.3 31.8 2.1 62.0
平均 Mean 86.9 4.9 33.4 34.3 2.2 61.3

图1  FS2106植株表型及育性特征

Fig.1  Phenotypic and fertility characters of FS2106 plants

A:植株形态;B:花序;C:花粉;D:染色体

A: Plant type; B: Spikelet;C:Pollen; D:Chromosome

2.2 FS2106植株雌性不育性的遗传方式与性状分离

2个杂交组合F1植株的雌穗均发育正常而且正常成熟,表现为雌性可育(图2),说明FS2106植株的雌性不育性状为隐性遗传。2个杂交组合的F2群体均出现了性状分离,后代出现了雌性可育和雌性不育2种植株类型。χ2检验的结果显示,雌性可育植株与雌性不育植株的数量符合3∶1的分离比(表3),说明FS2106植株的雌性不育性是受单基因控制的隐性遗传。

图2  亲本及F1植株雌穗育性及柱头颜色性状特征

Fig.2  Female sterility and stigma color trait of parental lines and F1 plants

红色箭头为柱头及其颜色, MS表示雄穗,FS表示雌穗,**表示雌穗缺失

Red arrow indicate stigma and its color; MS respected male spikelet; FS respected female spikelet, ** respected female spikelet missing

表3  不同组合F2群体雌性不育性状分离
Table 3  Segregation of female sterility in F2 population of different combinations

组合

Combination

F2总株数

Total of F2 plants

F2观测株数

Observed F2 plants

F2理论观测株数

Theoretical F2 plants

χ2

理论比例

Theoretical

separation

可育

Fertility

不育

Sterility

可育

Fertility

不育

Sterility

CL84 × FS2106 1384 1055 329 1038.00 346.00 1.05 3∶1
JF19-41 × FS2106 589 444 145 441.75 147.25 0.03 3∶1

χ20.05,1=3.84

2.3 FS2106植株柱头颜色性状的遗传方式与性状分离

柱头颜色是遗传改良的重要标记性状之一,FS2106与紫红色柱头亲本CL84杂交组合(CL84× FS2106)的F1和F2植株均表现为紫红色柱头;FS2106与白色柱头亲本JF19-41杂交组合(JF19-41× FS2106)的F1植株表现为紫红色柱头,说明FS2106的柱头颜色性状为紫红色而且相对于白色柱头为显性(图2)。杂交组合(JF19-41×FS2106)F2分离群体χ2检验的结果显示(表4),紫色柱头与白色柱头的分离比偏离了3∶1,但基本符合1对基因控制的遗传方式,这种偏分离可能与雌不育基因导致的雌穗异常发育相关。

表4  不同组合F2群体柱头颜色性状分离
Table 4  Segregation of stigma color trait in F2 population of different combinations

组合

Combination

F2总株数

Total of F2 plants

F2观测株数

Observed F2 plants

F2理论观测株数

Theoretical F2 plants

χ2

理论比例

Theoretical

separation

紫红色

Purple

白色

White

紫红色

Purple

白色

White

CL84 × FS2106 1384 1384 0 - - - -
JF19-41 × FS2106 444 300 144 333 111 12.688 3∶1

- 表示不发生性状分离;下同

- represents trait was without separate;The same as below

2.4 FS2106植株叶鞘颜色性状的遗传方式与性状分离

FS2106与紫色叶鞘亲本CL84杂交,其F1植株均为紫红色叶鞘(图3);FS2106与绿色叶鞘亲本JF19-41杂交,其F1植株也为紫红色叶鞘,说明FS2106植株的紫红色叶鞘相对于绿色叶鞘为显性。F2分离群体的χ2检验的结果显示(表5),紫红色叶鞘与绿色叶鞘性状的分离比符合3∶1,说明FS2106植株的紫色叶鞘性状是由1对基因控制的显性遗传,该性状也是薏苡苗期鉴定和遗传改良的重要标记性状。

图3  亲本及F1代植株叶鞘颜色性状特征

Fig.3  Leaf sheath color trait of parental lines and F 1 plants

虚线框内为叶鞘及其颜色

Dashed box were sheath and its color

表5  不同组合F2群体叶鞘颜色性状分离
Table 5  Segregation of leaf sheath color trait in F2 population of different combinations

组合

Combination

F2总株数

Total of F2 plants

F2观测株数

Observed F2 plants

F2理论观测株数

Theoretical F2 plants

χ2

理论比例

Theoretical

separation

紫红色

Purple

绿色

Green

紫红色

Purple

绿色

Green

CL84 × FS2106 1384 1384 0 - - - -
JF19-41 × FS2106 589 444 145 441.75 147.25 0.028 3∶1

2.5 FS2106植株总苞质地性状的遗传方式与性状分离

以FS2106与甲壳质总苞亲本JF19-41杂交,其F1植株的总苞均为甲壳质,该性状在F2群体也未发生分离,可能与F1植株数量较少有关(仅有2株F1植株)。以FS2106与甲壳质总苞亲本CL84杂交,其F1群体植株出现了珐琅质和甲壳质总苞的分离;将上述珐琅质和甲壳质总苞F1种子分区种植并单株自交获得F2群体,其中甲壳质F1植株自交获得的F2群体在该性状并未出现分离;而以珐琅质F1植株自交获得的F2群体,则出现了性状分离(图4)。χ2检验的结果显示(表6),珐琅质与甲壳质总苞的分离比符合3∶1。上述结果说明FS2106总苞质地性状为珐琅质,表现为单基因的显性遗传方式;而且该基因位点在F1群体就发生性状分离,表现出测交分离模式,说明总苞质地性状位点在FS2106中是杂合的。

图4  总苞质地性状在FS2106杂交群体的分离情况

Fig.4  Involurce texture trait divergence in FS2106 hybrid populations

C:甲壳质;E:珐琅质

C :Chitin involurces;E:Eenamel involurces

表6  不同组合F2群体总苞质地性状分离
Table 6  Segregation of involurce texture trait in F2 population of different combinations

组合

Combination

F2总株数

Total of F2 plants

F2观测株数

Observed F2 plants

F2理论观测株数

Theoretical F2 plants

χ2

理论比例

Theoretical

separation

珐琅质

Enamel

甲壳质

Chitin

珐琅质

Enamel

甲壳质

Chitin

CL84 × FS2106 361 265 96 270.75 90.25 0.407 3∶1
JF19-41 × FS2106 589 0 589 - - - -

3 讨论

3.1 薏苡雌性不育资源(基因)的发现与利用价值

在自然界,不同植物性别决定的差异往往产生单性花(如黄瓜、玉米等),葫芦科的黄瓜由于具有多种性别发育类型,是研究植物性别决定和发育的理想模型。近期,有学者通过EMS诱变获得了黄瓜全雄花(雌性不育)突变体,并发现其雌性不育是由乙烯合成基因ACS11突变引起的[

参考文献 25
百度学术    
25]。比较极端的情况是,不同性别的花生长在不同的植株上,即雌雄异株,最典型的就是猕猴桃和银杏。日本学者在猕猴桃中发现了2个性别决定关键基因SyGl和FrBy,这2个基因分别为抑雌因子和促雄因子,两者决定了猕猴桃雌雄异株的性别分化[
参考文献 26-27
26-27]。在粮食作物中,水稻雌性不育系的利用则最具代表性,其主要应用于水稻的杂交制种生产中。尽管水稻已经实现了相对成熟的“三系”和“两系”配套进行杂交种生产,但是在水稻的制种生产上,三系法往往受恢保关系制约且配组不自由,而两系法存在光照、温度等环境因子影响较大而育性不稳定等限制因素。另外,在收获杂交种子之前,需要人工先行割除恢复系,以免恢复系自交产生的种子混入杂交种子,致使杂交水稻实现全程机械化制种仍有阻碍。陈丽娟等[
参考文献 28
百度学术    
28]提出FM-Line+MS-line(雌性不育系FS+雄性不育系MS)的制种模式,成功开辟了一条利用水稻杂种优势大幅提高杂交水稻制种效率的新途径,其关键在于雌性不育系的利用。2022年中国学者报道了一个自然突变的水稻温敏雌性不育材料,克隆了首个水稻温敏雌性不育基因,并解析了由其介导的温敏雌性不育调控的新机制,有望助力实现杂交水稻全程机械化制种[
参考文献 29
百度学术    
29]。湖南杂交水稻中心则以转基因的手段,将水稻雌性育性恢复基因表达盒、花粉失活基因表达盒和红色荧光蛋白基因表达盒3种基因导入雌性不育植株,并结合荧光分选解决了雌性不育水稻的繁殖难题,实现了杂交水稻的机械化制种,尤其是混播混收的机械化制种[
参考文献 30
百度学术    
30]。本研究中的雌性不育株FS2106是在自然条件下由种子生长发育而来的雌性不育突变株,属于完全不具备雌花序而雄花序发育正常的隐性核不育株系,这与水稻的雌不育类型极为类似。雌不育植株FS2106的发现不仅丰富了薏苡遗传资源库,无疑也是薏苡杂种优势利用的突破性材料,也是今后杂交育种和产量提升的重要路径。

3.2 薏苡重要标记性状的遗传规律解析及育种应用

薏苡遗传研究起始于川谷和薏苡杂交[

参考文献 18
百度学术    
18,
参考文献 20-21
20-21
],当时更偏重于遗传改良和育种应用,诸多性状的遗传规律则仍不清楚。本研究团队前期研究也发现紫色叶鞘分别受2对显性互作基因和1对显性基因控制[
参考文献 31
百度学术    
31];紫色柱头则表现为1对基因控制的显性遗传[
参考文献 32
百度学术    
32];珐琅质总苞属于单基因显性遗传[
参考文献 33
百度学术    
33]。本研究则利用新发现的薏苡雌性不育株FS2106与不同表型的可育材料杂交,发现FS2106的雌性不育性由1对隐性基因控制,属于隐性核不育类型且不受细胞质的影响;柱头颜色、叶鞘色和总苞质地的遗传均属于单基因遗传,这与前期研究[
参考文献 31-33
31-33]基本一致。FS2106植株雌不育基因的挖掘是杂种优势利用的基础,而叶鞘颜色、柱头颜色、总苞质地等作为肉眼可见的标记性状,对薏苡的遗传改良和种子纯度鉴定也具有重要意义。

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