2015, 16(3):624-632.DOI: 10.13430/j.cnki.jpgr.2015.03.027
摘要:SsDREB是从盐地碱蓬克隆的一个DREB2 类转录因子,其表达受高盐和干旱诱导,而对ABA 和低温处理反应不明显。本文将SsDREB与绿色荧光蛋白(GFP)基因构建融合表达载体并在洋葱表皮细胞中进行瞬时表达,研究结果表明SsDREB编码蛋白定位在细胞的细胞核中;酵母转录激活实验证明,SsDREB能特异性结合DRE顺式作用元件,并能激活下游报告基因的表达;采用农杆菌介导法将SsDREB基因在35S 启动子的驱动下转入烟草中,获得的转基因植株对干旱和盐胁迫抗性均显著提高;为研究SsDREB过量表达提高转基因烟草抗旱、耐盐能力的分子机制,选取烟草中与提高质膜稳定性、消除活性氧和渗透平衡相关的8个逆境胁迫相关基因,以烟草α-tublin基因做为内参基因,利用半定量RT-PCR方法分析在正常生长条件下这8个基因在转基因烟草和对照烟草的表达情况,实验结果表明这8个基因都受外源SsDREB基因的调控,其中6个基因在转基因烟草中的表达量显著高于非转基因植株。
2013, 14(5):857-863.DOI: 10.13430/j.cnki.jpgr.2013.05.015
摘要:以纤毛鹅观草为材料,通过RT-PCR和RACE技术,作者首次克隆了一个纤毛鹅观草DREB类基因的全长cDNA序列,命名为RcDREB1。该基因编码蛋白含有一个保守的AP2结构域,表明该基因是AP2大家族的一个新成员。种系发生树分析表明,RcDREB1与小麦AP2家族DREB类基因高度同源。酵母单杂交试验表明,RcDREB1表达的蛋白具有特异结合干旱应答DRE元件的功能;通过实时定量PCR分析发现,高盐、干旱、重金属镉和低温胁迫均可诱导RcDREB1表达,但其对高盐反应较为显著。本研究表明,RcDREB1是DREB类转录因子基因,在介导植物响应逆境信号方面可能发挥着重要生物学功能,为进一步分析小麦族的进化和转基因应用奠定了基础。