病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化

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病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化
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中图分类号:Q78
基金项目:国家自然科学基金

Expression and Purification of Pathogen-induced Wheat ERF Transcription Factor TaERF1b in Escherichia coli

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为了得到纯化的TaERFlb活性蛋白，将TaERFlb基因含有AP2／ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中，构建GST-TaERFlb融合蛋白表达载体，并转化到犬肠杆菌BL21（DE3）中。0．1mmol／L1PTG即能诱导融合蛋白表达，37℃诱导4h或30℃诱导8h，融合蛋白均以包涵体的形式表达，16℃诱导12h，融合蛋白不表达。包涵体经溶解及稀释复性后，过GST亲和层析柱，获得纯化的融合蛋白，考马斯亮蓝法测得纯化蛋白的浓度约为0．5ug／ul，凝胶阻滞实验表明包涵体复性成功．所得蛋白具有生物活性：

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董娜,张增艳,辛志勇.病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化[J].植物遗传资源学报,2008,(3).

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