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首页 > 过刊浏览>2019年第20卷第1期 >207-214. DOI:10.13430/j.cnki.jpgr.20180524001 优先出版
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大麻THCA合成酶基因(CsTHCA)RNA干扰载体的构建及遗传转化
DOI:
10.13430/j.cnki.jpgr.20180524001
CSTR:
作者:
  • 姜颖

    姜颖

    1黑龙江省科学院大庆分院,大庆 163319;2黑龙江八一农垦大学,大庆 163319
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作者单位:

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通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

黑龙江省青年科学基金(QC2016037) ;国家国际科技合作专项(2015DFR50260)


The Construction of CsTHCA RNA Interference Vector and Its Genetic Transformation in Cannabis sativa L.
Author:
  • JIANG Ying

    JIANG Ying

    1Daqing Branch of Heilongjiang Academy of Sciences, Daqing 163319;2Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319
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    摘要:

    大麻THCA合成酶基因CsTHCA在调控大麻THC含量方面起着重要的作用。通过RT-PCR方法从大麻中克隆了CsTHCA,该基因开放阅读框全长1638 bp,共编码545个氨基酸。通过pSKint中间载体,构建CsTHCA RNA干扰植物转化载体并转化大麻茎尖,获得转基因植株,通过分析大麻中THCA合成酶基因的表达并结合薄层色谱法和SPE-HPLC法发现,转基因植株中基因表达量降低且THC含量降低,这表明CsTHCA通过某种机理正调控THC的含量。

    关键词:大麻;CsTHCA;RNA干扰;遗传转化
    Abstract:

    CsTHCA plays important role in regulating THC contents. In this study, we isolated the complete coding sequence of CsTHCA from Cannabis Sativa L., with an open reading frame of 1638 base pair. The deduced CsTHCA protein contained 545 amino acids. The CsTHCA RNA interference construct was generated through pSKint intermediate vector, which was transformed into the shoot tips of hemp. By analyzing the transcriptional level of CsTHCA by semi-quantitative RT-PCR and the THC content by thin-layer chromatography and SPE-HPLC, the reduction of CsTHCA expression and THC content was observed in transgenic lines relative to wild type. Thus, our results supported a positive role of CsTHCA in modulating THC content in hemp.

    Key words:Cannabis Sativa L.; THCA synthase gene(CsTHCA); RNA interference (RNAi); genetic transformation
    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

姜颖,孙宇峰,王晓楠,等.大麻THCA合成酶基因(CsTHCA)RNA干扰载体的构建及遗传转化[J].植物遗传资源学报,2019,20(1):207-214.

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  • 收稿日期:2018-05-24
  • 最后修改日期:2018-11-07
  • 录用日期:2018-08-29
  • 在线发布日期: 2019-05-22
  • 出版日期: 2019-01-16
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