摘要: 前期通过全基因组关联分析我们获得了一个苦荞耐盐相关基因FtGST2(FtPinG0707941400.01)。为了解FtGST2的基因结构与类型,我们通过同源比对和保守序列分析发现,苦荞中有69个GST基因家族的成员,该基因属于谷胱甘肽-s-转移酶(Glutathione S-transferases)中的四氯代氢醌脱卤素酶亚族(TCHQD)。对该基因上游2000 bp的启动子序列进行分析发现,34个元件中含有2个脱落酸(ABA)响应元件与6个茉莉酸甲酯(Me-JA)响应元件,而脱落酸与茉莉酸正是植物调控盐胁迫途径的重要激素。为进一步验证FtGST2的功能,我们从中苦3号中克隆出了FtGST2基因,对FtGST2在苦荞不同器官中的表达量和不同浓度NaCl处理下的表达量差异进行实验分析。结果显示,FtGST2在根中的表达量最高,并且FtGST2在100 mM NaCl处理下的表达量明显高于50 mM NaCl与未处理下的表达量。同时我们构建了FtGST2的过表达拟南芥与毛状根,并检测转基因材料在盐处理下的种子发芽率、主根长、毛状根鲜重及其生理指标。结果显示,过表达FtGST2的拟南芥发芽率和根长都高于与其相同处理的野生型,FtGST2的过表达毛状根在未处理条件下与对照组(A4)无明显差异,而在100 mM NaCl处理下的毛状根鲜重显著高于对照A4。对过表达毛状根与A4毛状根在100 mM NaCl处理下不同时间的表达量进行检测,发现FtGST2基因在受到盐胁迫3 h处表达量最高,6 h处下降,到12 h又有所上升。此外,对毛状根的生理指标进行检测后发现过表达FtGST2基因的确能有效提高苦荞毛状根过表达株系的耐盐性。以上实验对FtGST2基因的抗盐功能进行了初步验证,为后续苦荞耐盐品种的选育奠定了一定基础。
摘要: 十字花科作物主要受S位点的复等位基因控制着自交不亲和性(SI,self-incompatibility),羽衣甘蓝(Brassica oleracea var. acephala)是十字花科芸薹属中典型的自交不亲和性植物。本研究利用20对SSR引物首次构建了20个羽衣甘蓝自交系的指纹图谱,这套引物共鉴定到65个等位变异,平均每对引物含有3.25个变异。等权重算术平均聚类法(UPGMA)将它们聚类为3个遗传类群:OK1、OK2和OK3。利用SRK基因激酶区的特异性引物分析发现20个羽衣甘蓝自交系中共有9个SRK单元型,分别是8个Ⅰ类S单元型(SRK7、SRK13、SRK14、SRK16、SRK23、SRK36、SRK45和SRK51)和1个Ⅱ类S单元型(SRK15)。遗传类群OK1主要为SRK15单元型,占比50%,其次为SRK23单元型,占比20%;遗传类群OK2主要为SRK15、SRK16单元型,占比均为40%;遗传类群OK3主要为SRK23单元型,占比40%,OK1遗传类群拥有较多的SRK15单元型。亲和指数测定结果进一步验证了不同遗传类群内部或遗传类群间的自交系杂交的亲和关系,杂交组合配制的过程中应兼顾遗传类群和SRK单元型。
摘要: 热激蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)广泛介导了胁迫信号的传递,在控制人体细胞正常生长和促进肿瘤细胞发育中起着重要作用;目前,HSP90已成为细胞免疫、信号转导以及抗肿瘤研究的前沿课题。植物HSP90的生理功能研究起步较晚,最近的研究发现HSP90在植物发育、胁迫环境的应答以及抗病性中起着重要作用。本文从分子生物学角度,系统综述了植物HSP90分子作用机理研究的最新进展,以及在改良植物抗性上的应用,以期为通过基因工程方法改良作物抗性提供参考。